花青素類提取物對(duì)大鼠視網(wǎng)膜光損傷的保護(hù)作用.pdf

1、視網(wǎng)膜是感受和傳遞視覺(jué)信息的起始部位,也是體內(nèi)代謝最旺盛的組織之一,容易受到強(qiáng)光的影響而造成視覺(jué)功能障礙(如暗適應(yīng)功能)、光誘導(dǎo)視網(wǎng)膜損傷等。因此對(duì)視網(wǎng)膜光損傷的防護(hù)具有重要的軍事價(jià)值和臨床意義?；ㄇ嗨厥且活悘V泛存在于多種天然植物中的多酚類化合物,其在抗輻射損傷、抗氧化損傷、抗疲勞、抗衰老等方面進(jìn)行了廣泛的研究。據(jù)報(bào)道,英軍曾第二次世界大戰(zhàn)期間采用藍(lán)莓(富含花青素)作為保護(hù)暗適應(yīng)的一項(xiàng)措施,但是缺乏足夠的實(shí)驗(yàn)證據(jù)[2]。我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)理論

2、認(rèn)為黑米具有“明目活血”之功效,而現(xiàn)代研究表明從黑米皮中提取的黑米花青素(blackriceanthocyanidin)其抗氧化活性明顯高于常見(jiàn)的抗氧化劑如牛磺酸,類胡蘿卜素和維生素C,安全性研究尚未發(fā)現(xiàn)其具有明顯的急慢性毒副作用。為此,我們?cè)谇捌诠ぷ骰A(chǔ)上,進(jìn)一步完善了視網(wǎng)膜光損傷模型,探討了花青素類提取物對(duì)視網(wǎng)膜損傷的防護(hù)作用。
　　材料和方法：
　　72只成年SPF級(jí)雄性SD大鼠購(gòu)自第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需

3、要分批進(jìn)行實(shí)驗(yàn),隨機(jī)分至各組。其中花青素防護(hù)作用實(shí)驗(yàn)分為生理鹽水組、花青素組和混合組,分別采用生理鹽水、花青素提取物(純度25％,由西安皓天生物制劑有限公司提供)及氫飽和生理鹽水(按文獻(xiàn)方法自制)與花青素提取物混合進(jìn)行腹腔注射給藥,花青素不同給藥方式和時(shí)間實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、灌胃和滴眼組,連續(xù)給藥1周、2周、4周。利用本實(shí)驗(yàn)室自制的光損傷箱進(jìn)行視網(wǎng)膜光損傷造模。采用RETIport視覺(jué)電生理系統(tǒng)(Roland,德國(guó))進(jìn)行視網(wǎng)膜電圖(elec

4、troretinogram,ERG)檢查,常規(guī)組織病理學(xué)制備觀察石蠟標(biāo)本,根據(jù)標(biāo)本定位方向,以視盤(pán)為中心,上下每隔0.5mm進(jìn)行切片觀察,對(duì)各切片部位大鼠視網(wǎng)膜的外核層細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行計(jì)數(shù)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)利用SPSS17.0軟件進(jìn)行分析。
　　結(jié)果：
　　1.不同環(huán)境溫度:10±2℃(低溫),20±2℃(室溫)和30±2℃(高溫)分組進(jìn)行光暴露時(shí),視網(wǎng)膜損傷程度(ERG波幅值和視網(wǎng)膜ONL細(xì)胞層數(shù))高溫組>低溫組和室溫組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、意義(P<0.05)。
　　2.花青素組(100mg/kg)、花青素-氫飽和生理鹽水混合組(100mg/kg)和生理鹽水組損傷眼各ERG反應(yīng)的波幅值均下降,其中生理鹽水組幅值下降最為明顯,與自身對(duì)照眼比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),花青素組與混合組雙眼ERG幅值差值明顯低于生理鹽水組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　三組大鼠損傷眼的視網(wǎng)膜ONL細(xì)胞層數(shù)均有所下降,部分位置的數(shù)據(jù)與自身對(duì)照眼相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

6、義(P<0.05),尤其以視網(wǎng)膜上部區(qū)域以及視神經(jīng)乳頭周邊1-2mm范圍內(nèi)最為明顯?；ㄇ嗨亟M及混合組損傷眼的ONL細(xì)胞層數(shù)明顯多于生理鹽水組,三組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3.花青素(100mg/kg,1次/d)灌胃,1周時(shí)已經(jīng)有一定的保護(hù)作用,到2周效應(yīng)最為明顯,與對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但是到4周時(shí)其效應(yīng)出現(xiàn)下降。花青素滴眼(滴眼液濃度為4%,0.1ml/次/d)對(duì)視網(wǎng)膜光損傷的保護(hù)

7、效應(yīng)呈現(xiàn)時(shí)間依賴性的特點(diǎn),1周時(shí)最低,4周時(shí)最高,與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度對(duì)大鼠視網(wǎng)膜光損傷造模有影響,在高溫時(shí)會(huì)加重視網(wǎng)膜損傷,提示進(jìn)行視網(wǎng)膜光損傷造模時(shí)應(yīng)當(dāng)注意通風(fēng),保持適宜的環(huán)境溫度。
　　2.花青素類提取物對(duì)大鼠視網(wǎng)膜光損傷有一定的預(yù)防保護(hù)作用,花青素與氫飽和生理鹽水混合組的作用與單純使用花青素類提取物作用相似。
　　3.灌胃給藥以及滴眼給藥方式