兼具抗PAF活性的新型AChE抑制劑PMS777神經(jīng)藥理學(xué)活性研究.pdf

1、腦內(nèi)選擇性膽堿能神經(jīng)元缺失和促炎因子介導(dǎo)的慢性中樞炎癥是阿爾茨海默病(Alzheimet’s disease，AD)的關(guān)鍵病理生理機(jī)制，因此對(duì)這兩個(gè)病理生理過程的干預(yù)對(duì)于AD的治療具有重要意義。本課題應(yīng)用生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、組織病理學(xué)和行為學(xué)等手段，對(duì)兼具血小板活化因子(platelet-activating factor，PAF)拮抗和乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase，AChE)抑制活性的新型四氫呋喃類化

2、合物PMS777的神經(jīng)藥理學(xué)作用進(jìn)行了系統(tǒng)研究。結(jié)果表明，PMS777(1-100uM)通過與PAF競(jìng)爭(zhēng)膜受體，濃度依賴性地抑制PAF誘發(fā)的兔血小板聚集；同時(shí)抑制前腦皮質(zhì)勻漿和神經(jīng)元培養(yǎng)上清中的AChE，對(duì)AChE具有相對(duì)選擇性(AChE：IC<,50>=2.48±0.12 uM；丁酰膽堿酯酶：IC<,50>=4.47±0.15uM)；PM$777(5，10，20或40 mg／kg，i.p.)也能劑量依賴性地抑制腦內(nèi)AChE的活性。行為

3、學(xué)和組織病理學(xué)研究表明，PMS777(0.25.5 mg／kg，ip.)劑量依賴性地改善東莨菪堿(ip)引起的小鼠記憶重現(xiàn)障礙以及脂多糖(腦室內(nèi)注射)引起的大鼠炎性癡呆；并減輕脂多糖引起的腦內(nèi)(特別是海馬和前腦)炎癥反應(yīng)，包括小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活以及神經(jīng)元形態(tài)改變。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，PMS777(10.100uM)通過拮抗PAF受體，明顯減輕PAF(10 μM)對(duì)SH—SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的毒性，其分子生物學(xué)機(jī)制涉及b

4、cl一2／bax和COX-2基因的表達(dá)調(diào)控及caspase一3相關(guān)性機(jī)制；在相同的濃度范圍內(nèi)，PMS777也能夠通過調(diào)控凋亡或炎癥相關(guān)基因的表達(dá)，抑制AD關(guān)鍵致病分子Aβ(本研究中應(yīng)用Ap<,25-35> 20μM)的神經(jīng)毒性。 本研究在國(guó)內(nèi)外首次提出AChE和PAF雙靶點(diǎn)干預(yù)AD的設(shè)想，并通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證明，PMS777是一種兼有PAF受體拮抗和AChE抑制活性的新型雙靶點(diǎn)化合物，在分子水平通過調(diào)控凋亡或炎癥相關(guān)基因的表達(dá)抑