腎母細胞瘤螺旋CT征象與CD34、VEGF、MMP-7表達間關系的研究.pdf

1、背景與目的：腎母細胞瘤(Nephroblastoma)又稱Wilms'瘤或腎胚胎瘤，是小兒腹部最常見的惡性腫瘤之一，占小兒實體瘤的8％，占小兒腎臟腫瘤的80％以上。腎母細胞瘤生長迅速，惡性程度高，發(fā)生轉(zhuǎn)移早，可轉(zhuǎn)移至腎靜脈，亦可轉(zhuǎn)移到肺、肝及淋巴結(jié)等，瘤細胞侵犯及轉(zhuǎn)移是影響其療效而致患者死亡的主要原因之一。目前，影像學的發(fā)展為其術前診斷和分期提供了有力的幫助。用于腎母細胞瘤的檢查技術包括超聲、X線(腹部X線平片、CT、靜脈腎盂造影、下腔

2、靜脈造影和腎動脈造影)、MRI等，與其它幾項檢查技術相比，CT尤其是螺旋CT(SpiralCT,SCT)診斷價值較高，它不但能確定病變的位置、形態(tài)還能準確測量其大小，并能顯示包膜是否完整、鄰近組織器官的浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠處器官轉(zhuǎn)移情況，對治療方案的選擇和判斷預后起重要作用，是腎母細胞瘤目前主要的影像學檢查方法。 腎母細胞瘤的發(fā)生是多因素、多基因參與的過程，其浸潤和轉(zhuǎn)移是一個復雜的生物學行為，也是惡性腫瘤的主要生物學特征之一

3、，是影響預后的一個重要因素。隨著對腫瘤基因水平的深入研究，發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移與血管生成及細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix，ECM)的降解密切相關。其中血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶家族(matrixmetalloporteinases，MMPs)是目前研究腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的熱點之一。VEGF是一高度特異的血管內(nèi)皮細胞有絲分裂原，具

4、有促進血管內(nèi)皮細胞增殖、促進血管生成、增加血管通透性以及血管維持功能，被認為是作用最強、特異性最高的調(diào)控血管生成因子。VEGF與腫瘤血管生成關系密切，在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用，對判斷腫瘤預后有重要意義。CD34是標記血管內(nèi)皮細胞的敏感物質(zhì)，可用來檢測微血管密度(MircovesselDensity,MVD)，評價腫瘤的血管生成。MMPs是降解細胞外基質(zhì)的主要酶類之一，其中基質(zhì)金屬蛋白酶-7(MMP-7，Matril

5、ysin)是降解型膠原最主要的酶，可以降解細胞外基質(zhì)和血管基底膜，從而破壞了機體防御腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移的自然屏障，增加了癌細胞的侵襲性，促進了腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移。MMP-7具有廣泛的底物特異性和強大的基質(zhì)降解能力，從而在腫瘤血管生成的過程中促進了內(nèi)皮細胞的遷移，大量研究發(fā)現(xiàn)MMP-7可以降解細胞外基質(zhì)和刺激血管內(nèi)皮細胞DNA合成來促進血管生成。VEGF、MMP-7在腎母細胞瘤的表達具有協(xié)同作用，共同參與了腎母細胞瘤的惡性進展。VEGF、MMP

6、-7、MVD均與腎母細胞瘤的分期、腎包膜侵犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關。 目前，SCT在腎母細胞瘤中的診斷價值和浸潤、轉(zhuǎn)移相關基因在腎母細胞瘤中的表達及病理意義研究較多。但是小兒腎母細胞瘤的SCT檢查與分子生物學結(jié)合起來的研究尚未見報道。本研究采用免疫組化(SP法)檢測VEGF、MMP-7在腎母細胞瘤中的表達，探討其在腎母細胞瘤浸潤和轉(zhuǎn)移中所起的作用，并將其與術前的SCT征象結(jié)合起來研究，旨在評價腎母細胞瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移SCT征象與病理

7、學、分子生物學特性間的關系，依據(jù)其影像學表現(xiàn)特點來推測腎母細胞瘤的惡性程度，為臨床治療方案的選擇及預后的評估提供影像學依據(jù)。 材料與方法：本研究收集了術前行SCT檢查，術后經(jīng)病理證實的腎母細胞瘤標本38例，所有標本均經(jīng)10％福爾馬林液固定，石蠟包埋。38例腎母細胞瘤標本中男23例，女15例，年齡5月-10歲，平均2.51±1.04歲，其中SCT征象和手術病理診斷鄰近結(jié)構(gòu)侵犯分別為13例和11例，SCT征象和手術病理診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

8、分別為12例和11例，3例肺部轉(zhuǎn)移?；純盒g前均未行化療及放療。腫瘤HE染色由兩位病理科醫(yī)師明確診斷并作組織病理分型，按美國腎母細胞瘤研究組(Nationalwilms'TumorStudyGroup，NWTSG)的標準分為兩型：組織結(jié)構(gòu)良好型(FavorableHistology,FH型)31例和組織結(jié)構(gòu)不良型(UnfavorableHistology,UH型)7例。根據(jù)術中情況和病理特點按美國腎母細胞瘤研究組(NWTS-5)標準判定臨

9、床病理分期，其中Ⅰ期14例，Ⅱ期9例，Ⅲ期12例，Ⅳ期3例。SCT檢查采用美國GEHispeedAdvantageRP22SCT機，全部病例行平掃加增強掃描。SCT檢查按上述分期標準分期結(jié)果為Ⅰ期13例，Ⅱ期11例，Ⅲ期11例，Ⅳ期3例。采用免疫組織化學(SP法)染色檢測38例腎母細胞瘤石蠟切片中VEGF、MMP-7、CD34表達情況。統(tǒng)計學分析：所有資料采用SPSS12.0軟件處理，以a=0.05為顯著性檢驗水準。 結(jié)果：1.

10、38例腎母細胞瘤SCT雙期增強掃描的檢查率為100％，定性診斷率為100％，是腎母細胞瘤術前檢查的有力工具。 2.SCT征象上有、無鄰近結(jié)構(gòu)侵犯組間，MVD值分別為(46.86±6.87)條/視野和(26.85±8.59)條/視野，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，VEGF的陽性表達分別為12例和10例，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，MMP-7的表達密度分別為(63.13±9.27)％和(33.64±5.60)％

11、，兩者比較差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 3.SCT征象上有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間，MVD值平均分別為(47.52±6.73)條/視野和(27.31±8.74)條/視野，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，VEGF的陽性表達分別各為11例，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，MMP-7的陽性表達密度分別為(64.38±8.44)％和(34.19±6.17)％，兩者比較差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 4.在腎母

12、細胞瘤SCT分期中高分期(Ⅲ+Ⅳ期)14例和低分期(Ⅰ+Ⅱ期)24例中MVD值分別為(46.21±7.03)條/視野和(26.39±8.46)條/視野，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，VEGF的陽性表達分別為12例和10例，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，MMP-7的表達密度分別為(61.93±9.97)％和(33.11±5.04)％，兩者比較差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，MVD值及VEGF、MMP-7的陽性表達均與臨

13、床分期有關。 5.腎母細胞瘤組織病理分型中FH型31例和UH型7例間VEGF的陽性表達分別為17例和5例，兩者比較無明顯相關性(P＞0.05)，MVD值分別為(29.65±9.68)條/視野和(51.58±5.86)條/視野，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，MMP-7的表達密度分別為(37.74±10.22)％和(70.26±2.63)％，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 6.VEGF表達陽性組22例與陰

14、性組16例間，MMP-7的平均表達密度分別為(59.51±11.40)％和(32.25±4.31)％，兩者比較差異顯著(P＜0.05)，MVD值分別為(41.88±8.21)條/視野和(22.44±7.51)條/視野，兩者比較具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，MMP-7與MVD進行直線相關分析，兩者顯著相關(r=0.917，P＜0.001) 結(jié)論：1.SCT雙期增強掃描是腎母細胞瘤治療前一項頗有價值的診斷技術，能較準確反映其病理學

15、基礎。 2.SCT征象上鄰近結(jié)構(gòu)侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和SCT分期中高分期中的MVD的值及VEGF的表達明顯增多，VEGF的表達與腎母細胞瘤的轉(zhuǎn)移有關，血管生成可能是腎母細胞瘤惡性進展的重要促進因素，MVD的多少在一定程度上可以反映腎母細胞瘤的惡性程度。 3.SCT征象上鄰近結(jié)構(gòu)侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和SCT分期中高分期中的MMP-7的表達明顯增多，MMP-7的表達量與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移關系密切。 4.UH型和FH型腎母細胞瘤

16、血管生成活性不盡相同，UH型腎母細胞瘤高度惡性行為可能與其豐富血運有關。 5.腎母細胞瘤組織中VEGF與MMP-7的表達密切相關，提示二者之間存在某種調(diào)控關系，二者協(xié)同參與了腎母細胞瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移過程。聯(lián)合檢測兩項指標有助于進一步了解腎母細胞瘤的浸潤轉(zhuǎn)移機制，對預測腎母細胞瘤的轉(zhuǎn)移、判斷其預后、選擇治療方案，同時為抗微血管生成治療腎母細胞瘤提供理論依據(jù)。 6.腎母細胞瘤的部分SCT征象與MVD值及VEGF、MMP-7的表