海洋溶菌酶治療陰道炎的應(yīng)用研究.pdf

1、目的：探討海洋溶菌酶的抗菌作用和對(duì)大鼠細(xì)菌性陰道炎的治療作用及作用機(jī)制。方法：采用海洋生物工程制藥技術(shù)，自海洋牡蠣軟體中制備海洋溶菌酶。應(yīng)用最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)法測(cè)定海洋溶菌酶和體外對(duì)生孢梭菌CMCC(B)64941、白色念珠菌CMCC(F)98001、G+細(xì)菌、G-細(xì)菌的MIC和MBC。復(fù)制大鼠細(xì)菌性陰道炎病理模型，以陰道分泌物的細(xì)菌轉(zhuǎn)陰率和陰道粘膜炎癥的治愈程度為指標(biāo)，觀察海洋低溫溶菌酶對(duì)大鼠細(xì)菌性陰道炎的

2、治療作用。透射電鏡觀察海洋溶菌酶的抗菌作用機(jī)制。結(jié)果：海洋溶菌酶對(duì)厭氧菌和真菌具有抗菌作用：對(duì)生孢梭菌的最低抑菌濃度為0.0156％，最低殺菌濃度為0.0313％；對(duì)白色念珠菌CMCC(F)98001的最低抑菌濃度為0.0625％，最低殺菌濃度為0.0625％。海洋溶菌酶對(duì)G+、G-細(xì)菌亦具有抗菌作用：對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC范圍0.25-16ug/ml，MIC50為4ug/ml，MIC90為16ug/ml；對(duì)表皮葡萄球菌MIC范圍0.

3、0625-8ug/ml，MIC50為1ug/ml，MIC90為4ug/ml；對(duì)腸球菌的MIC范圍0.25-16ug/ml，MIC50為4ug/ml，MIC90為16ug/ml；對(duì)大腸埃希氏菌的MIC范圍0.125-32ug/ml，MIC50為4ug/ml，MIC90為32ug/ml；對(duì)銅綠假單胞菌的MIC范圍0.0625-32ug/ml，MIC50為2ug/ml，MIC90為8ug/ml；對(duì)肺炎克雷伯桿菌的MIC范圍0.125-16ug

4、/ml，MIC50為2ug/ml，MIC90為16ug/ml；對(duì)不動(dòng)菌屬的MIC范圍是0.25-32ug/ml，MIC50為4ug/ml，MIC90為32ug/ml。研究表明，海洋溶菌酶對(duì)金黃色葡萄球菌(JP-04-08)株的MBC為0.5mg/ml；對(duì)金黃色葡萄球菌(ATOC25922)株的MBC為0.25mg/ml；對(duì)銅綠假單胞菌(LN-04-12)株的MBC為0.25mg/ml；對(duì)銅綠假單胞菌(ATOC27853)株的MBC為0.

5、5mg/ml；對(duì)大腸埃希氏菌(DC-04-21)株和(ATOC25923)株的MBC分別為0.25mg/ml和0.5mg/ml；對(duì)表皮葡萄球菌(BP-04-18)株的MBC為0.25mg/ml，對(duì)變形桿菌(BX-04-10)株的MBC為1mg/ml。在復(fù)制大鼠細(xì)菌性陰道炎的病理模型基礎(chǔ)上，研究證明海洋溶菌酶大劑量(10mg/kg)、中劑量(5mg/kg)、小劑量(2.5mg/kg)均對(duì)大鼠金葡菌和大腸埃希氏菌混合感染引起的細(xì)菌性陰道炎有

6、明顯的治療作用，治愈程度分別為92.9％、82.1％和64.3％，且呈量-效依賴性。透射電鏡觀察到，正常大腸埃希氏菌形態(tài)為直桿狀，細(xì)胞壁和細(xì)胞膜完整光滑，結(jié)構(gòu)緊密，細(xì)胞膜緊貼細(xì)胞壁，細(xì)胞質(zhì)均勻。溶菌酶作用1h，細(xì)胞壁松弛出現(xiàn)皺褶，菌體變短、粗，細(xì)胞質(zhì)固縮；2h后，大部分菌株呈圓球形，3h后，菌體呈不規(guī)則形，細(xì)胞壁缺失，細(xì)胞質(zhì)解體出現(xiàn)空腔，菌體裂解。提示本品作用部位在細(xì)胞壁。結(jié)論：海洋溶菌酶抗菌譜廣，對(duì)多種革蘭氏陽性及陰性菌、厭氧菌和白色