黃毛耳草黃酮類化合物提取純化的研究.pdf

1、本研究?jī)?yōu)化了黃毛耳草總黃酮的提取工藝；確定了用大孔樹脂和聚酰胺純化黃毛耳草總黃酮的條件；篩選了發(fā)酵黃毛耳草的真菌--木霉，研究了木霉發(fā)酵對(duì)提取黃毛耳草總黃酮的影響。
　　 根據(jù)單因素試驗(yàn)的結(jié)果，設(shè)置合適的水平，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)考察浸提次數(shù)、乙醇濃度、提取時(shí)間和液料比對(duì)提取效果的影響。通過方差分析，在考察的影響因素中，影響最顯著的因素是提取乙醇的濃度，其次是提取次數(shù)，提取時(shí)間的影響最小，同時(shí)確定了最佳的提取工藝，即用12倍于黃毛耳

2、草體積的70％乙醇提取2次，每次1.5小時(shí)。重現(xiàn)性試驗(yàn)表明此工藝重現(xiàn)性好，工藝可行。在用此工藝所得到的提取物中，總黃酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12.32％。
　　 從五種大孔樹脂選擇用NKA-9對(duì)黃毛耳草總黃酮進(jìn)行初步純化，通過進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附試驗(yàn)，確定了初步純化工藝為以1.5 mL/min的速率將濃度約為2.5 mg/mL提取液上柱，再用10 BV pH=5的水淋洗，以除去多糖雜質(zhì)，淋洗速率為1.5 mL min，最后用3 BV的70％乙醇2

3、.0 mL/min洗脫。用NKA-9初步純化后雖然所得固體中的黃酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)提高了20.33％，達(dá)到32.65％，但純度仍然不高需要進(jìn)一步純化。
　　 通過靜態(tài)吸附試驗(yàn)比較硅膠和聚酰胺純化黃毛耳草總黃酮的優(yōu)劣，發(fā)現(xiàn)聚酰胺比硅膠更適合用于黃毛耳草總黃酮的進(jìn)一步純化。本研究所確定的聚酰胺純化黃毛耳草總黃酮的工藝為用10 BV pH=5的水淋洗以除去糖，再用4 BV50％的乙醇洗脫，此工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性高，是可行的。用聚酰胺進(jìn)一步純化，