研究胸-腹水細(xì)胞CD44v8-10-CD44v10差異性表達(dá)和SP-A基因?qū)Ψ蜗侔┑脑\斷價(jià)值.pdf

1、　　目的 應(yīng)用RT-PCR和DNA印跡雜交技術(shù),檢測(cè)惡性病變引起胸/腹水脫落細(xì)胞中CD44v8-10、SP-A(Surfactant Protein-A)基因的表達(dá),探討CD44v8-10/CD44v10比值與SP-A基因在胸/腹水診斷中的臨床意義,探討對(duì)原發(fā)性肺腺癌引起的惡性胸/腹水組織來源判定、組織學(xué)分型的應(yīng)用價(jià)值。
　　方法 (1) 應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)性RT-PCR技術(shù),對(duì)良/惡性病變引起胸/腹水中脫落細(xì)胞的CD44v8-10和CD4

2、4v10基因進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性同步擴(kuò)增和凝膠圖像分析,對(duì)CD44v8-10和CD44v10進(jìn)行半定量分析,計(jì)算惡性病變引起胸/腹水脫落細(xì)胞的CD44v8-10/CD44v10比值,與良性病變所引起的胸/腹水脫落細(xì)胞的CD44v8-10/CD44v10比值進(jìn)行對(duì)比,建立一種通過檢測(cè)基因表達(dá)量來判斷病變性質(zhì)的分子生物學(xué)指標(biāo)；(2) 應(yīng)用RT-PCR技術(shù),檢測(cè)胸/腹水細(xì)胞中的SP-A基因擴(kuò)增,經(jīng)Southern blot驗(yàn)證,判定引起胸/腹水的病變性

3、質(zhì)、組織來源或組織學(xué)類型；(3) 培養(yǎng)肺腺癌細(xì)胞(GLC-82),與白細(xì)胞配伍成梯度濃度的樣本,探求本實(shí)驗(yàn)技術(shù)對(duì)判斷惡性病變性質(zhì)的敏感程度。
　　結(jié)果 (1) 惡性病變導(dǎo)致的胸/腹水CD44v8-10/CD44v10比值均大于1.00(3.62±2.06/3.39±2.36),良性病變引起的胸/腹水CD44v8-10/CD44v10比值均小于1.00(0.48±0.29/0.55±0.50),良/惡性病變CD44v8-10/CD4