人精母細(xì)胞重組頻率與年齡和聯(lián)會(huì)復(fù)合體長(zhǎng)度的相關(guān)性分析.pdf

1、研究背景:非整倍體嚴(yán)重危害人類生殖健康,是導(dǎo)致不育不孕、自發(fā)流產(chǎn)及先天性出生缺陷的重要原因。人類絕大多數(shù)非整倍體是減數(shù)分裂過(guò)程中,染色體不分離所致。分子遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn),50％的47,XXY,80%的45,X和100%的47,XYY非整倍體患兒都是由于父方減數(shù)分裂染色體不分離引起的。直接對(duì)精子染色體組成進(jìn)行的研究也表明,約7.64%的人類精子是非整倍體。因此,了解減數(shù)分裂過(guò)程中非整倍體精子的發(fā)生機(jī)制對(duì)促進(jìn)男性生殖健康、提高人口質(zhì)量顯得尤為

2、重要。
　　研究目的:本文通過(guò)對(duì)可育男性減數(shù)分裂Ι的研究,對(duì)在個(gè)體之間的重組頻率和常染色體上聯(lián)合復(fù)合體的測(cè)定,了解可育男性重組頻率差異程度,并分析年齡因素對(duì)遺傳重組的關(guān)聯(lián)性和重組位點(diǎn)在聯(lián)會(huì)復(fù)合體上分布的特點(diǎn)。
　　研究方法:本文對(duì)其中6例來(lái)自老年男性前列腺癌患者去勢(shì)手術(shù)和4例來(lái)自睪丸腫瘤手術(shù)的睪丸組織標(biāo)本,組織病理學(xué)分析證實(shí)生精過(guò)程正常,通過(guò)鋪展法制備聯(lián)會(huì)復(fù)合體結(jié)合免疫熒光染色技術(shù),以SCP3(聯(lián)會(huì)復(fù)合體蛋白3,標(biāo)記聯(lián)會(huì)復(fù)合

3、體側(cè)軸成分)抗體、MLHl抗體(標(biāo)記重組位點(diǎn))和CREST抗血清(標(biāo)記著絲粒蛋白),分別對(duì)減數(shù)分裂Ι的進(jìn)程各時(shí)期細(xì)胞比例、粗線期精母細(xì)胞同源染色體重組頻率及常染色體上SC的總長(zhǎng)度進(jìn)行測(cè)定,分析年齡因素與減數(shù)分裂遺傳重組的關(guān)聯(lián)性和重組位點(diǎn)與聯(lián)會(huì)復(fù)合體長(zhǎng)度之間的關(guān)系。
　　結(jié)果:對(duì)10例可育男性減數(shù)分裂Ι的進(jìn)程進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)可育男性細(xì)線期,偶線期,及粗線期細(xì)胞比例個(gè)體間未見(jiàn)明顯差異(p>0.05),每個(gè)細(xì)胞中重組位點(diǎn)平均數(shù)為49.4±

4、4.4,范圍為33～63,具有顯著的個(gè)體差異,只有0.4%(1/220)的常染色體SC上缺少M(fèi)LH1位點(diǎn)。對(duì)10例男性所有常染色體的SC的長(zhǎng)度進(jìn)行測(cè)量發(fā)現(xiàn)每個(gè)平均SC的長(zhǎng)度范圍為354μm～385μm,其與重組位點(diǎn)的發(fā)生存在正相關(guān)性.對(duì)年齡因素與個(gè)體間重組位點(diǎn)的差異的相關(guān)性分析結(jié)果示年齡因素對(duì)常染色體(r=0.6,p=0.43)及性染色體(r=-0.35,p=0.15)的重組均無(wú)關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)論:可育男性減數(shù)分裂Ι的各細(xì)胞比例與重