巖黃連規(guī)范化種植及其藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)研究.pdf

1、巖黃連系罌粟科紫堇屬多年生草本植物石生黃堇Corydalis saxicola Bunting的干燥全草，是黔、桂石灰?guī)r地區(qū)名貴中藥材，性涼味苦，具有清熱解毒、利濕止痛、散瘀消腫等功能。I臨床上用于治療瘡癤腫毒、急性黃疸型肝炎、肝硬化、肝癌等疾病，療效顯著。野生巖黃連主要分布于廣西、貴州、云南、湖北、四川等省區(qū)，在廣西主要分布于東蘭、巴馬、鳳山等縣。隨著其制劑臨床應(yīng)用逐年增加，原料的需求量亦日益增大。而巖黃連原植物分布局限于石灰?guī)r山區(qū)，

2、屬石山特有種，生境惡劣，自然繁殖率低，資源蘊(yùn)藏量十分有限。多年來(lái)由于人們大量采挖和收購(gòu)，導(dǎo)致野生資源瀕于枯竭，為開(kāi)發(fā)利用和保護(hù)巖黃連種質(zhì)資源，保證巖黃連資源的可持續(xù)發(fā)展，我們?cè)趶V西東蘭縣建立了巖黃連規(guī)范化種植基地，進(jìn)行了巖黃連引種馴化、人工栽培試驗(yàn)，并且以《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》(試行)(GAP)為指導(dǎo)，對(duì)巖黃連的種質(zhì)資源、生物學(xué)特性、育苗栽培、田間管理、采收加工等規(guī)范化種植中的關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行了研究，并開(kāi)展了巖黃連藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。在此

3、基礎(chǔ)上，制訂了巖黃連藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范化生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)。研究結(jié)果總結(jié)如下： 1巖黃連種植基地的選擇及環(huán)境質(zhì)量評(píng)價(jià) 從巖黃連栽培社會(huì)歷史背景、種植地地理氣候條件、土壤以及環(huán)境質(zhì)量等多方面評(píng)價(jià)與選定種植地，避免隨意引種栽培。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，廣西東蘭是巖黃連傳統(tǒng)主產(chǎn)區(qū)之一，積累了一定的栽培經(jīng)驗(yàn)，該地區(qū)的氣候條件和土壤都適宜巖黃連的生長(zhǎng)。對(duì)種植地的大氣、土壤和灌溉水質(zhì)進(jìn)行了檢測(cè)，其大氣、土壤和灌溉水質(zhì)量均符合《中藥材生

4、產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。因此，本研究將種植地設(shè)于遠(yuǎn)離居民生活區(qū)、工業(yè)區(qū)和交通要道的東蘭鎮(zhèn)達(dá)文村。 2巖黃連栽培技術(shù)與病蟲(chóng)害防治 對(duì)巖黃連育苗技術(shù)、種植栽培、田間管理技術(shù)、病蟲(chóng)害防治等規(guī)范化種植過(guò)程中的關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行了總結(jié)。首先，對(duì)巖黃連開(kāi)展了種子育苗試驗(yàn)，摸索出了巖黃連播種育苗的理想方法，解決了大面積栽培中的種苗來(lái)源問(wèn)題。試驗(yàn)表明，7～8月是巖黃連的適宜播種期。先播種育苗，再營(yíng)養(yǎng)杯假植，然后移栽大田。病蟲(chóng)害的調(diào)查發(fā)

5、現(xiàn)，巖黃連的病害主要有莖基腐病、灰霉病等，尤以莖基腐病危害最為嚴(yán)重。采取種植前土壤消毒、高壟栽培、適時(shí)通風(fēng)控制土壤空氣濕度、增施磷鉀肥或生物菌肥等田間栽培管理技術(shù)進(jìn)行農(nóng)業(yè)綜合防治；以預(yù)防為主，發(fā)病初期即噴施波爾多液，發(fā)現(xiàn)病株實(shí)時(shí)摘除，隔離菌源。以農(nóng)業(yè)生態(tài)防治為主，結(jié)合化學(xué)防治，可有效預(yù)防和控制巖黃連病害的發(fā)生發(fā)展。 3巖黃連有效成分分析方法研究 針對(duì)與巖黃連主要藥理作用相關(guān)的有效部位(總生物堿)和有效成分(脫氫卡維汀)，

6、分別建立了酸性染料比色法和高效液相色譜法定量分析質(zhì)控方法，質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)與藥效密切相關(guān)，這對(duì)確保巖黃連藥材質(zhì)量至關(guān)重要。同時(shí)，對(duì)巖黃連藥材中生物堿類成分還進(jìn)行了色譜指紋圖譜的初步研究。本研究建立的脫氫卡維汀HPLC定量分析、總生物堿含量分析以及HPLC指紋圖譜等質(zhì)量控制關(guān)鍵技術(shù)，可用于對(duì)巖黃連不同采收期、不同產(chǎn)地干燥加工方法、不同追肥處理等生產(chǎn)出的藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)研究，對(duì)制訂巖黃連規(guī)范化種植標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保巖黃連藥材質(zhì)量的穩(wěn)

7、定與可控，以及巖黃連的開(kāi)發(fā)利用等，均具有十分重要的作用。 4巖黃連中生物堿的動(dòng)態(tài)積累及器官分布研究 就巖黃連不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期、不同采收部位、產(chǎn)地干燥加工方法等因素與其有效成分在生長(zhǎng)發(fā)育季節(jié)積累變化、器官組織分布的相關(guān)性進(jìn)行了研究，探討其有效成分、有效部位等的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)，為巖黃連栽培技術(shù)、適宜采收期的確定、綜合利用等方案的合理制定提供科學(xué)依據(jù)，為科學(xué)地制訂巖黃連規(guī)范化種植標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)以及巖黃連資源開(kāi)發(fā)利用提供理

8、論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。同時(shí)，還嘗試應(yīng)用色譜指紋圖譜技術(shù)對(duì)不同采收期、不同器官組織部位、不同干燥方法巖黃連藥材樣品的化學(xué)成分進(jìn)行分析研究。從巖黃連植物生長(zhǎng)發(fā)育的角度，揭示了巖黃連主要有效成分脫氫卡維汀和總生物堿在植株中的積累分布規(guī)律，為科學(xué)地確定藥材的合理采收期、入藥部位提供了理論依據(jù)。 5施肥對(duì)巖黃連藥材產(chǎn)量與質(zhì)量影響的研究 施用不同種類的肥料對(duì)巖黃連總生物堿和脫氫卡維汀含量均有較大影響，且對(duì)總生物堿含量的影響更明顯?？傮w來(lái)

9、看，均衡N、P、K養(yǎng)分供應(yīng)(施用復(fù)合肥)有利于促進(jìn)巖黃連的生長(zhǎng)，同時(shí)其有效成分含量亦相對(duì)較高。配施鉀肥對(duì)巖黃連有效成分含量的影響呈負(fù)效應(yīng)。 6巖黃連藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 在上述實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上，對(duì)巖黃連藥材水分、浸出物、灰分及酸不溶性灰分、重金屬等檢查項(xiàng)目進(jìn)行了測(cè)定，并確定了限量標(biāo)準(zhǔn)。阿時(shí)以巖黃連中特征性成分脫氫卡維汀為對(duì)照品，建立了巖黃連藥材薄層色譜定性鑒別方法，以及巖黃連藥材中脫氫卡維汀和總生物堿的含量測(cè)定方法及含量范圍

10、標(biāo)準(zhǔn)，為保證巖黃連藥材內(nèi)在質(zhì)量的可控性和均一性提供科學(xué)依據(jù)，將對(duì)巖黃連藥材的質(zhì)量控制起到積極的促進(jìn)作用。 7巖黃連規(guī)范化生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 在對(duì)巖黃連的生物學(xué)特性和種植技術(shù)進(jìn)行深入研究，對(duì)傳統(tǒng)種植經(jīng)驗(yàn)總結(jié)提高的基礎(chǔ)上，制訂了巖黃連規(guī)范化生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)。本SOP以保證藥材內(nèi)在質(zhì)量為核心，對(duì)藥材種植環(huán)境、栽培管理技術(shù)、采收加工方法等藥材生產(chǎn)全過(guò)程進(jìn)行了全面的規(guī)范，形成了完整的藥材生產(chǎn)流程，對(duì)巖黃連種植生產(chǎn)具有重要的