新型栓塞劑溫敏納米凝膠的應(yīng)用基礎(chǔ)研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開(kāi)論述：
　　第一部分 PIB納米凝膠溫敏相變特性及其生物相容性的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:研究聚(N-異丙基丙烯酰胺-co-甲基丙烯酸丁酯)(PIB)納米凝膠的溫敏相轉(zhuǎn)變特性及其生物相容性。
　　材料和方法:采用目視法結(jié)合瓶倒轉(zhuǎn)法和體外推注試驗(yàn)來(lái)觀察 PIB納米凝膠的溫敏溶膠-凝膠相轉(zhuǎn)變特性。體外培養(yǎng) L929細(xì)胞,以不同濃度的PIB納米凝膠浸提液培養(yǎng)細(xì)胞3天后,采用CCK-8比色試驗(yàn)法檢測(cè) PIB

2、納米凝膠浸提液對(duì) L929細(xì)胞活性的影響。體外培養(yǎng) L929細(xì)胞,以不同濃度的PIB納米凝膠培養(yǎng)細(xì)胞2天,采用鈣黃綠素-AM/碘化丙啶熒光雙染活/死細(xì)胞后,激光共聚焦顯微鏡下觀察、細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法評(píng)價(jià) PIB納米凝膠對(duì) L929細(xì)胞存活率的影響。日本大耳白兔15只,在其背部一側(cè)肌肉注射PIB納米凝膠,另一側(cè)注射生理鹽水,觀察術(shù)后1、2、4、12、26周材料周?chē)慕M織反應(yīng)情況。
　　結(jié)果:PIB納米凝膠在36.5℃時(shí)發(fā)生溶膠-凝膠相轉(zhuǎn)

3、變。它對(duì) L929細(xì)胞具有良好的細(xì)胞相容性且無(wú)明顯細(xì)胞毒性存在。兔背部植入部位肌肉組織無(wú)異常病變,沒(méi)有嚴(yán)重的炎癥反應(yīng),組織病理學(xué)檢查結(jié)果符合材料植入后局部反應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。
　　結(jié)論:PIB納米凝膠具有良好的生物相容性和溫度敏感的相轉(zhuǎn)變特性。
　　第二部分 PIB納米凝膠栓塞兔腎動(dòng)脈的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:研發(fā)了一種新型液體栓塞劑,聚(N-異丙基丙烯酰胺-co-甲基丙烯酸丁酯)(PIB)溫敏納米凝膠,它可以在體溫下通過(guò)溶膠

4、-凝膠相變轉(zhuǎn)變而固化。我們進(jìn)一步用兔腎動(dòng)脈栓塞模型,研究它在血管內(nèi)的分布模式、炎癥反應(yīng)及栓塞血管的持久性。材料和方法:實(shí)驗(yàn)1中,PIB納米凝膠栓塞18只實(shí)驗(yàn)兔的右腎動(dòng)脈,按不同的注射速度均分為3組。栓塞后1小時(shí)處死動(dòng)物,取出腎臟,接觸X線和組織學(xué)觀察評(píng)價(jià)PIB納米凝膠在腎動(dòng)脈內(nèi)的分布模式。實(shí)驗(yàn)2中,PIB納米凝膠以合適的注射速度注射,栓塞20只實(shí)驗(yàn)兔的右腎動(dòng)脈,按栓塞后不同的處死時(shí)間點(diǎn)(1周、1月、2月、3月)均分成4組,每組5只。處死

5、前復(fù)查血管造影評(píng)價(jià)血管再通,處死后病理學(xué)評(píng)價(jià)栓塞的有效性和對(duì)PIB納米凝膠的炎癥反應(yīng)。
　　結(jié)果:所有實(shí)驗(yàn)兔均能成功栓塞。在實(shí)驗(yàn)1中,注射速度越高,PIB納米凝膠越能到達(dá)更小的動(dòng)脈分支。以0.10ml/s的速度注射,可以使 PIB納米凝膠均勻地分布在段動(dòng)脈到腎小球毛細(xì)血管前水平。在實(shí)驗(yàn)2中,后續(xù)的血管造影復(fù)查未發(fā)現(xiàn)血管再通。沒(méi)有發(fā)現(xiàn)血管壁的破裂和血管內(nèi)膜下出血,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)栓塞劑的外溢和新生血管形成。組織學(xué)上只有輕微的炎癥反應(yīng),表現(xiàn)為

6、少數(shù)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn),無(wú)異物肉芽腫形成。
　　結(jié)論:PIB納米凝膠栓塞腎動(dòng)脈容易而可控,可以產(chǎn)生均勻和持久的栓塞效果,不伴有嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。因此,PIB納米凝膠是一種較理想的栓塞材料。
　　第三部分 PIB納米凝膠栓塞兔 VX2移植性肝癌模型的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:觀察聚(N-異丙基丙烯酰胺-co-甲基丙烯酸丁酯)(PIB)溫敏納米凝膠經(jīng)肝動(dòng)脈栓塞對(duì)兔肝功能及VX2肝癌生長(zhǎng)的影響。
　　材料和方法:MR已證實(shí)

7、的30只兔 VX2肝癌模型隨機(jī)分為3組,每組10只,經(jīng)肝動(dòng)脈分別給予生理鹽水(A組)、超液態(tài)碘油+明膠海綿粉(B組)、PIB納米凝膠(C組)。治療前1天及治療后3、7天檢測(cè)血清 ALT和AST水平。治療后7天處死動(dòng)物,取肝腫瘤組織進(jìn)行病理學(xué)觀察,計(jì)算腫瘤壞死率。處死前 MR掃描,計(jì)算腫瘤體積、生長(zhǎng)率。
　　結(jié)果:治療前1天的腫瘤體積,治療前1天及治療后7天的ALT、AST水平,3組之間互相對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。治療后3