載VEGF溫敏納米凝膠修飾膀胱無細(xì)胞基質(zhì)的研究.pdf

1、目的:膀胱無細(xì)胞基質(zhì)(bladder acellular matrix allograft,BAMA)可以作為支架允許組織再生,但存在明顯的攣縮。BAMA植入體內(nèi)后的血管再生不足被認(rèn)為是限制其成組織能力的關(guān)鍵因素。血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)具有明確的促進血管再生的功能。本研究擬通過納米生物技術(shù)將VEGF復(fù)合到BAMA,實現(xiàn)VEGF對BAMA的長期、有效修飾。

2、　　方法:以聚乳酸-羥基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]為納米粒子制備材料,通過單變量和關(guān)鍵因素的多變量研究,獲得雙乳化-溶劑蒸發(fā)技術(shù)制備載VEGF納米粒子的最佳配方和制各參數(shù)。利用Pluronic(R)F127嵌段聚合物的溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變特性,將納米尺度的載VEGF納米粒子復(fù)合到多孔隙的膀胱無細(xì)胞基質(zhì)中并良好駐留。評價納米粒子特性、緩釋出的VEGF功能、納米溶膠—凝膠轉(zhuǎn)變體系的性能、VE

3、GF的緩釋情況等。
　　結(jié)果:研究優(yōu)選出載VEGF納米粒子的優(yōu)選配方:PLGA用量為20mg、有機相體積為2ml、初乳乳勻時間定為2min、初乳乳勻速率定為3Krpm,外水相乳化劑種類和濃度為1.5％PVA+2％TW80,復(fù)乳乳勻時間為5.5min,乳勻轉(zhuǎn)速為6krpm,有機相與外水相體積比為0.45。在此條件下制各的納米粒子粒徑均值為291.2nm,蛋白包封率為(48.82±0.12)％,掃描電鏡提示制備的納米粒子表面光滑、粒徑

4、均一。自納米粒子中緩釋出的VEGF仍可以刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。25％的Pluronic(R)F127溶液適合本研究的需要,其溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變溫度為20℃。利用該溶膠-凝膠轉(zhuǎn)變體系可以使載VEGF的納米粒子良好地駐留在多孔隙的膀胱無細(xì)胞基質(zhì)中,VEGF緩釋更平穩(wěn),緩釋時間達2月以上。
　　結(jié)論:
　　1、通過單因素研究和關(guān)鍵因素的多變量研究,獲得了制備PLGA納米粒子的優(yōu)選配方,制備的納米粒子藥物包封率、粒徑等指標(biāo)均得到優(yōu)化;