可注射型殼聚糖溫敏凝膠負(fù)載富血小板血漿和骨髓基質(zhì)細(xì)胞促進(jìn)牙周再生的研究.pdf

1、摘要目的：制備殼聚糖溫敏凝膠及富含血小板血漿(Pl沖)，將二者以不同比率共混后觀察其微觀結(jié)構(gòu)；觀察殼聚糖溫敏凝膠／Pl沖共混物的浸提液對犬骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)增殖、分化的作用。方法：1、制備殼聚糖凝膠，從全血中提取PRP并對其進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)。2、將殼聚糖溫敏凝膠及PRP按不同體積比共混后分為5組：A組，單純殼聚糖溫敏凝膠；B組，殼聚糖溫敏凝膠：PRP=2：1；C組，殼聚糖溫敏凝膠：PI沖=1：1；D組，殼聚糖溫敏凝膠：PRP=I：

2、2；E組，單純PRP。將各組實(shí)驗(yàn)材料冷凍干燥后觀察其大體及微觀結(jié)構(gòu)。3、根據(jù)以上分組制備殼聚糖溫敏凝膠／PRP共混物的浸提液。4、體外分離培養(yǎng)犬BMSCs，通過MTT法及堿性磷酸酶試劑盒檢測以上各組浸提液對第3代犬BMSCs增殖、分化的影響。結(jié)果：1、殼聚糖／BGP溶液在37℃孵箱內(nèi)8“10min形成凝膠；對本方法制備的PRP進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，其濃度約為濃縮前的8倍。2、隨著加入PRP比率的增大，殼聚糖溫敏凝膠的孔徑亦逐漸增大：A組為50

3、um左右；B組為3060urn；C組為100200um；D組為200300um；E組為200500um。3、成功地分離、培養(yǎng)出犬BMSCs，體外生長良好，培養(yǎng)三代后的犬BMSCs生長更趨活躍。B，C，D，E組浸提液與A組比較均可促進(jìn)BMSCs的增殖及堿性磷酸酶水平的表達(dá)。結(jié)論：PRP可以增大殼聚糖溫敏凝膠的孔徑；C組和D組的孔徑已達(dá)到較為理想的組織工程支架材料的要求。殼聚糖溫敏凝膠共混PRP后使PRP獲得緩釋功能，進(jìn)而促進(jìn)犬BMSCs增

4、殖和分化，殼聚糖溫敏凝膠／PI沖共混復(fù)合物有望成為促進(jìn)牙周組織再生的生物支架材料。關(guān)鍵詞：殼聚糖：富含血小板血漿；骨髓基質(zhì)干細(xì)胞；牙周組織再生目錄弓l言1第一部分殼聚糖溫敏凝膠的合成及富含血小板血漿的制備2材料和方法2結(jié)果一3討論”4第二部分殼聚糖溫敏凝膠／PRP共混物的結(jié)構(gòu)觀察6材料和方法6結(jié)果一7討論”9第三部分殼聚糖溫敏凝膠負(fù)載PRP后對BMSCs作用11材料和方法11結(jié)果13討論14全文總結(jié)16參考文獻(xiàn)17綜述“19綜述的參考文