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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文富血小板血漿和根面脫礦對(duì)牙周細(xì)胞在病變牙根表面附著、增殖的影響姓名:戴海燕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):口腔內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師:劉琪20050401碩士畢業(yè)論文PRP和根面脫礦對(duì)牙周細(xì)胞在病變牙根表面附著、對(duì)殖的影響富血小板血漿和根面脫礦對(duì)牙周細(xì)胞在病變牙根表面附著、增殖的影響研究生:戴海燕導(dǎo)師:劉琪(遵義醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院口腔內(nèi)科教研室)摘要目的:研究富血小板血漿(Pletalet—RichPlasm8,PRP)和根面脫礦
2、對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞(HumanGingivalfibroblasts,HGFs),牙周膜成纖維細(xì)胞(Periodontal1igamentfibroblasts,PDLFs)及牙槽骨細(xì)胞(AlveolarbonecellS,ABCs)在病變牙根表面附著、增殖的影響,以進(jìn)一步探討PRP和根面脫礦處理在促牙周組織再生中的可能作用。方法:采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)原代人牙周三種細(xì)胞并傳代,取5~8代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn);PRP的制備采用二步密度梯度離心法,
3、取人新鮮全血(已加入抗凝劑)第一次離心(1300r/min)10分鐘,吸取全部上清液及交界面以下l~2mm的沉淀部分移至另一離心管,棄去下層的沉淀部分,再次離心(2000r/min)10分鐘獲取下層為PRP,棄去上層的貧血小板血漿(P1etalet—PoorP1asma,PPP);病變牙根片的制備是取因重度牙周病拔除的病牙,拔除前用鉛筆在牙根表面標(biāo)記出牙周袋累及的范圍,然后用刮治器刮凈病牙根面上殘留的組織,并在冷水冷卻的條件下用金剛砂片
4、將牙根磨成4X4mm2大小、imm厚(只磨除牙本質(zhì)側(cè),牙骨質(zhì)側(cè)不磨)的根片,收集的根片經(jīng)高壓處理后留存待用。實(shí)驗(yàn)分組為脫礦組和未脫礦組,脫礦PRP組和未脫礦PRP組。首先將病變根片固定在48孔板中,等分量接種3X10‘cells/ml,培養(yǎng)24小時(shí)和48小時(shí),通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)法、四唑鹽比色法(MTT法)觀(guān)察人牙周三種細(xì)胞在PRP和根面脫礦處理的病變根面的附著和增殖,同時(shí)通過(guò)掃描電鏡觀(guān)察病變牙根面及其附著的牙周細(xì)胞的形態(tài)。結(jié)果:細(xì)胞計(jì)數(shù)法顯示
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