改良富血小板血漿對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖及礦化作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級碩士學(xué)位論文改良富血小板血漿對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖及礦化作用的實(shí)驗(yàn)研究Researchofmodifiedplatelet—richplasmaontheproliferationandmineralizationofbonemarrowmesenchymalstemcellsinVitro課題來源：學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院耷顓輸段建民主任醫(yī)師口腔臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)型碩士研究生南方醫(yī)科大學(xué)

2、研究生學(xué)院答辯委員會主席吳補(bǔ)領(lǐng)教授答辯委員會委員黃世光陳柯韋曦林雪峰教授教授教授副教授2014年5月20日廣州II摘要體和組織學(xué)、免疫組織化學(xué)特性，成軟骨相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)增強(qiáng)，且可促進(jìn)軟骨下的骨組織再生。在骨的形成和修復(fù)中骨膜通過血管形成和提供骨祖細(xì)胞發(fā)揮著關(guān)鍵作用。E1backlyRM等【‘7J提出了使用PI沖薄膜和自體骨髓來源BMSCs(PRP／BMSCs凝膠薄膜)作為骨膜替代物圍繞著骨引導(dǎo)支架來引導(dǎo)骨缺損的再生，研究發(fā)現(xiàn)PI沖

3、／BMSCs凝膠薄膜在體外能夠顯著地誘導(dǎo)人內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，并且增加人工培養(yǎng)的BMSCs的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(BMP2)表達(dá)；這些細(xì)胞還分泌大量的可溶親血管生成因子如PDGFBB、VEGF、IL8等，促進(jìn)血管的形成。最終，PRP／BMSCs凝膠薄膜作為骨膜替代物在免疫抑制小鼠和兔部分骨缺損動(dòng)物模型中，均驗(yàn)證了它在骨膜仿生中發(fā)揮的增強(qiáng)骨再生作用。劉興文等【8】通過體外觀察PRP對自體BMSCs堿性磷酸酶活性的影響，結(jié)果顯示PRP能促進(jìn)BMSC

4、s成骨標(biāo)志物堿性磷酸酶活性，說明PI沖能誘導(dǎo)BMSCs向成骨細(xì)胞分化，并且提高BMSCs的分化能力。但是，也有一些反對者認(rèn)為PI心沒有或很少有正面的促進(jìn)作用。Aghaloo等【9】在一個(gè)對兔顱骨缺損修復(fù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，PRP加入自體骨移植后組織形態(tài)評估顯示僅輕度大于單獨(dú)的自體骨移植，并未發(fā)現(xiàn)顯著性差異。一些研究甚至表明PRP起到了負(fù)面的抑制作用，PI沖在免疫功能不全的老鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭校瑴p少了脫礦骨基質(zhì)的成骨誘導(dǎo)，并且抑制了脫礦骨基質(zhì)的活

5、性【101。BMSCs來源于中胚層，具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和橫向分化潛能。大量的研究表明，在體外特定的誘導(dǎo)條件下BMSCs可分化為骨、軟骨、神經(jīng)、脂肪、肌肉及肝等多種功能細(xì)胞，對間質(zhì)組織如骨、軟骨、肌鍵、脂肪和骨髓基質(zhì)的再生也有重要作用【11151。Mamatopolllos掣16J首次報(bào)道了從成年大鼠的骨髓獲取的BMscs，在體外培養(yǎng)條件下能形成鈣化的骨樣組織，經(jīng)X線衍射分折，證實(shí)鈣化組織具有羥基磷灰石樣結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)表明體外培養(yǎng)BMSCs可