人參皂苷Re對小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖的雌激素樣作用.pdf

1、目的:究人參皂苷Re(GS-Re)對小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)體外增殖的作用及其可能機制研,為研發(fā)MSC增殖失調(diào)相關(guān)性疾病的有效藥物提供實驗證據(jù)。
　　 方法:采用小鼠骨髓原代MSC集落形成實驗、MSC傳代純化細(xì)胞計數(shù)和MTT比色實驗,觀察GS-Re、-Rg1、-Rh1和ppt對MSC譜系細(xì)胞體外增殖的影響。進行MSC傳代純化細(xì)胞培養(yǎng),設(shè)置GS-Re組、GS-Re+ICI182780(雌激素受體拮抗劑)組、雌二醇組、雌二醇+

2、ICI182780組、ICI182780組和正常培養(yǎng)對照組,觀察人參皂苷-Re對MSC增殖的雌激素樣作用,并采用BrdU摻入法、流式細(xì)胞周期分析和Western blot探索其作用機制。
　　 結(jié)果:在5～20μmol/L范圍內(nèi),各濃度GS-Re組和GS-Rg1組的MSC集落產(chǎn)率和MSC傳代細(xì)胞計數(shù)高于對照組。與對照組相比,1～20μmol/L濃度范圍內(nèi)各GS-Re組MSC傳代擴增細(xì)胞的MTT吸光值均顯著增高,5～20μmol/

3、L范圍內(nèi)各GS-Rg1濃度組的MTT吸光值也顯著增高。GS-Re和GS-Rg1對MSC集落產(chǎn)率、MSC傳代細(xì)胞計數(shù)和MTT吸光值的影響均呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系,而且,GS-Re的作用更強。在0.5～20μmol/L范圍內(nèi),各濃度GS-Rh1組和ppt組與對照組之間上述實驗指標(biāo)的差異都無顯著性意義。在201μmol/L GS-Re和10-8μmol/L雌二醇的培養(yǎng)體系中分別加入10-6mol/L的ICI182780后,MSC集落產(chǎn)率和平均面積

4、均顯著減低。MSC傳代純化細(xì)胞培養(yǎng)體系中20μmol/L的GS-Re和10-8μmol/L的雌二醇能提高BrdU摻入陽性細(xì)胞百分率,ICI182780加入體系則能抵消這種效應(yīng)。與對照組相比,Re組和雌二醇組MSC傳代擴增細(xì)胞的G0/G1期百分比均降低,而G2/M期百分比均增高；雌二醇組細(xì)胞的S期百分比也增高。ICI182780能抑制GS-Re和雌二醇對MSC傳代擴增細(xì)胞分裂周期的影響。與對照組比,Re組和雌二醇組MSC傳代細(xì)胞的ERK1