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文檔簡介
1、[目的]
研究骨髓間充質(zhì)干細胞(BonemarrowMesenchymalStemCells,BMMSCs)對骨髓CD34+細胞增殖的影響,為骨髓CD34+細胞體外擴增的深入研究提供依據(jù)。
[方法]
①VarioMACS分選器進行骨髓CD34+細胞的分選,用流式細胞術(shù)進行骨髓CD34+細胞純度鑒定;②采用密度梯度離心法分離引產(chǎn)胎兒骨髓單個核細胞,結(jié)合貼壁法進行BMMSCs的體外擴增培養(yǎng),并用流式
2、細胞術(shù)進行BMMSCs表面標志鑒定;③用Transwell培養(yǎng)板培養(yǎng)骨髓CD34+細胞與BMMSCs,自動細胞計數(shù)儀計數(shù)有活性的骨髓CD34+細胞數(shù)量,并采用MTT比色法檢測骨髓CD34+細胞增殖活性。
[結(jié)果]
①流式細胞術(shù)檢測顯示分選所得的骨髓CD34+細胞純度通??蛇_到90%以上;②流式細胞術(shù)檢測顯示傳至第3代繼續(xù)培養(yǎng)72h后的BMMSCs高表達CD44、CD29,而HLA-DR、CD45、CD34陰性
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