貧血小板血漿和根面脫礦對人牙周細胞在病變牙根面附著和增殖的影響.pdf

1、遵義醫(yī)學院碩士學位論文貧血小板血漿和根面脫礦對人牙周細胞在病變牙根面附著和增殖的影響姓名：張海燕申請學位級別：碩士專業(yè)：口腔內(nèi)科指導教師：劉琪20050401遵義醫(yī)學院碩士研究生畢業(yè)論文貧血小板血漿和根面脫礦對人牙周細胞在病變牙根面附著和增殖的影響研究生張海燕 導師 劉琪摘 要目的：觀察貧血小板血漿( P l a t e l e t ．p o o rp l a s m a ，P P P ) 和根面脫礦單獨及聯(lián)合應(yīng)用對人牙齦成纖維細胞(

2、H u m a n g i n g i v a lf i b r o b l a s t s ，H G F s ) 、牙周膜成纖維細胞( H u m a n p e r i o d o n t a l l i g a m e n t f i b r o b l a s t s ，H P D L F s )和牙槽骨細胞( H u m a n a l v e o l a Tb o n ec e l l S ，H A B C s ) 在病變矛

3、根面的附著及增殖的影響，同時，觀察附著于經(jīng)不同處理的瘸變牙根表面的這三種牙周細胞的超微結(jié)構(gòu)，探討P P P 和根面脫礦處理在促牙周組織再生中的可能作用。 方法：采用組織塊培養(yǎng)法進行H G F s 、H P D L s 和H A B C s的體外培養(yǎng)；P P P 是從人新鮮全血中應(yīng)用梯度密度二步離心法獲取，新鮮全血( 已加入抗凝劑) 第～次離心( 1 3 0 0 r ／m i n ) 1 0 分鐘，吸取全部上清液及交界面以下1 ～2 m

4、m 的沉淀部分移至另一離心管，棄去下層的血細胞，再次離心( 2 0 0 0 r ／m i n ) 1 0 分鐘取上層即為P P P ； 病變牙根片的制備是選取因重度牙周病拔除的病牙，拔除靜用鉛筆在根表面標記出牙周袋累及的范圍，然后用刮治器刮凈病牙根面上殘留的組織，并在冷蒸餾水水冷卻的條件下用金剛砂片將牙根磨成4 X 4 X l m m 3 大小( 只磨除牙本質(zhì)側(cè)，牙骨質(zhì)側(cè)不磨) 的根片，收集的根片經(jīng)高壓滅菌處理后留存待用。經(jīng)P P P

5、和E D T A ( 2 4 ％，p H = 6 ．7 ) 分別和聯(lián)合處理的病變根片的三組作為實驗組，未處理的病變根片作為對照組，共分成四組，之后將培養(yǎng)5 至8代的細胞分別接種到各組根片上，分別通過細胞計數(shù)法、四唑鹽比色法【3 - ( 4 ，5 一d i m e t h y l t h i a z o l 一2 一y O ·2 ，5 - d i p h e n y lt e t r a z o l i u mb r o m i

6、 d e ，M T T ] 和掃描電鏡檢測三種牙周細胞在不同處理病變牙根表蕊的附著、增殖和形態(tài)。結(jié)果：( 1 ) 細胞計數(shù)結(jié)果：與未處理組相比，P P P 組及根面脫礦組均能促進人牙周三種細胞對病變根面的附著( 尸 O ．0 5 ) ，與單獨經(jīng)P P P 處理和根面脫礦處理相比，P P P 和報面脫礦聯(lián)合處理促細胞附著效果明顯增強( J 口< O ．0 1 ) ；( 2 ) M T T 結(jié)果顯示：來處理組中人三種牙周細胞體外培養(yǎng)4