幾丁糖預(yù)防兔膝關(guān)節(jié)粘連的實驗研究.pdf

1、目的：粘連是結(jié)締組織纖維帶與相鄰的組織或器官結(jié)合在一起而形成的異常結(jié)構(gòu)。術(shù)后粘連是外科臨床上常見的并發(fā)癥，膝關(guān)節(jié)粘連導(dǎo)致關(guān)節(jié)攣縮，運動范圍(RangeofMotion，ROM)明顯減少。在手術(shù)部位放置可降解、吸收的高分子材料，可以保護(hù)手術(shù)創(chuàng)面，減少出血，抑制瘢痕組織形成，術(shù)后防止粘連，減少攣縮。幾丁糖溶液是一種具有粘彈性的高分子生物材料，將幾丁糖用于膝關(guān)節(jié)術(shù)中，可包饒關(guān)節(jié)面，來防止術(shù)后粘連。本實驗設(shè)置兔膝關(guān)節(jié)滑膜切除術(shù)模型，術(shù)中放置幾丁

2、糖以觀察其術(shù)后預(yù)防粘連的效果為目的。 方法：將16只健康，成年的家兔(雌雄不分)隨機(jī)分為兩組，一組為幾丁糖組即實驗組，和對照組。所有動物在無菌相同的條件下均行右側(cè)膝關(guān)節(jié)滑膜切除術(shù)，并搔剮髕上囊區(qū)域，幾丁糖組術(shù)區(qū)(髕上囊區(qū)域為主)放置幾丁糖注射液，對照組不放，術(shù)畢用石膏管型將兔膝關(guān)節(jié)固定于屈曲位，時間為4周，對左側(cè)膝關(guān)節(jié)不行任何處理。每組兔子先行膝關(guān)節(jié)活動角度的測量，為準(zhǔn)確地測量固定4周后膝關(guān)節(jié)的活動角度，采用在恒定伸膝外力作用下

3、測量膝關(guān)節(jié)活動角度的方法。動物深度麻醉去除管型后，取平臥位，將右大腿固定，膝下10cm處用繃帶套住右小腿，另一端系彈簧秤均勻力量(500g)行水平牽引，使膝關(guān)節(jié)被動伸直方向。先用細(xì)克氏針折彎與兔子股骨脛骨縱軸一致，在兔膝關(guān)節(jié)攣縮和拉伸后各形成一角度，描于紙上，并得到兩者的差值，就是膝關(guān)節(jié)活動角度，這樣測三遍，然后用高精確度的測角儀測出每只兔子膝關(guān)節(jié)活動角度，以其平均值作為結(jié)果。然后動物行右膝關(guān)節(jié)的大體觀察，半定量計分，一盲法觀察者觀測，

4、并作半定量評估。記分標(biāo)準(zhǔn)：無粘連為0分，薄膜樣弱粘連為1分，輕度粘連為2分，中度粘連為3分，嚴(yán)重的纖維性粘連為4分。大體觀察之后，將測完角度的兔子處死，在髕上囊處取粘連組織，標(biāo)本烘干，貯存于-20℃冰箱中。膠原中含有12.5％的羥脯氨酸(質(zhì)量)，故可通過測量粘連組織中羥脯氨酸的含量來折算總膠原含量。先測出標(biāo)準(zhǔn)羥脯氨酸濃度的紫外線吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線紫外線分光光度儀在560um處測溶液吸光率，再測定樣品羥脯氨酸吸光度，得出羥脯氨酸的含量。

5、膠原質(zhì)量=羥脯氨酸質(zhì)量×8。接著立即切下帶著軟組織的右膝關(guān)節(jié)，在10％福爾馬林-10％硝酸混合夜中固定、脫鈣1周(大頭針可輕松刺入骨組織)，自來水沖洗，取髕上囊周圍的粘連組織，經(jīng)常規(guī)處理制成切片，行飽和苦味酸-天狼猩紅染色，偏振光顯微鏡下觀察。拍攝照片用LERCAQWinV3軟件分析膠原Ⅰ/Ⅲ(面積)。所有數(shù)據(jù)經(jīng)過SPSS10.0統(tǒng)計軟件包處理，結(jié)果用(X)±S表示。檢驗方法是隨機(jī)分組設(shè)計的兩樣本均數(shù)比較的t檢驗，以P＜0.05表示差異

6、有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果：實驗組和對照組兔子各有1只死亡，1只實驗組兔子因石膏管形出現(xiàn)壓迫性潰瘍不能使用，除去這3只兔子，留有13只動物作為研究對象。7只對照組動物膝關(guān)節(jié)被動活動范圍較小，而6只實驗組兔子膝關(guān)節(jié)被動活動范圍較大。動物生物力學(xué)實驗結(jié)果：對照組：30.29°±5.438°，實驗組：44.33°±5.125°。統(tǒng)計學(xué)結(jié)果，則對照組膝關(guān)節(jié)孿縮程度高于實驗組有顯著性差異。大體觀察時發(fā)現(xiàn)粘連成較厚的纖維粘連組織，而實驗粘連教薄弱

7、，對照組盲法半定量評分結(jié)果是3.14±0.556分，而實驗組是2.16±0.408分。統(tǒng)計學(xué)結(jié)果，則對照組粘連程度高于實驗組有顯著性差異。生物化學(xué)分析測得羥脯氨酸的質(zhì)量，然后利用公式羥脯氨酸的質(zhì)量×8得到膠原的質(zhì)量，這樣1mg干燥粘連組織中的總膠原含量是：對照組134.03±11.68ug，實驗組80.06±10.13ug。統(tǒng)計學(xué)結(jié)果，則對照組粘連組織中的膠原含量高于實驗組有顯著性差異。粘連組織切片經(jīng)飽和苦味酸-天狼猩紅染色，纖維鏡偏光