腸部分切除吻合術(shù)對(duì)豚鼠小腸cajal間質(zhì)細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:通過(guò)制作豚鼠十二指腸部分切除吻合術(shù)模型,結(jié)合免疫組化、免疫熒光、肌電活動(dòng)記錄等方法觀察cajal間質(zhì)細(xì)胞在修復(fù)過(guò)程中的數(shù)量、分布及生長(zhǎng)情況,了解cajal間質(zhì)細(xì)胞的突起能否通過(guò)生長(zhǎng)延長(zhǎng)重新形成細(xì)胞網(wǎng)絡(luò),探討cajal間質(zhì)細(xì)胞的自主節(jié)律性;同時(shí)探討藥物甲磺酸伊馬替尼是否對(duì)cajal間質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和肌電活動(dòng)產(chǎn)生影響,腸蠕動(dòng)功能是否能夠得到恢復(fù),最終為防治和治療胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙性疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:1、動(dòng)物分組:選用90

2、只健康雄性清潔級(jí)豚鼠,體重200~250g。動(dòng)物隨機(jī)分成兩組、A組正常對(duì)照組(10只)。B組為手術(shù)組(80只)分為術(shù)后自由喂養(yǎng)組和術(shù)后給藥兩組,每組40只。2、模型建立與取材:給予戊巴比妥鈉腹腔注射進(jìn)行動(dòng)物麻醉實(shí)施十二指腸部分切除吻合術(shù),術(shù)后各組均按7、15、30、50天分別處死后,取吻合部位腸管。3、組織病理檢查:麻醉后取出吻合部位經(jīng)HE及免疫組化和免疫熒光染色后,光鏡下觀察記錄。4、肌電活動(dòng)檢測(cè):麻醉后取出吻合部位,將電極插入肌層,

3、通過(guò)BL-420系統(tǒng)檢測(cè)腸道肌電活動(dòng)情況。
　　結(jié)果:1.術(shù)后動(dòng)態(tài)觀察吻合處生長(zhǎng)情況:肉眼觀察未見(jiàn)粘連、感染、梗阻、出血及瘺口,吻合口頭端和尾端腸管末見(jiàn)狹窄或膨脹?？v行切片經(jīng)HE染色光鏡下觀察,正常對(duì)照組可見(jiàn)正常的十二指腸縱行結(jié)構(gòu),各層組織清晰。手術(shù)組十二指腸吻合部位可見(jiàn)吻合口腸腔面為粘膜上皮覆蓋,漿膜面為結(jié)締組織所覆蓋,吻合部位也可見(jiàn)較多的結(jié)締組織,內(nèi)含大量膠原纖維、成纖維細(xì)胞及毛細(xì)血管,但未見(jiàn)明顯的炎性細(xì)胞侵潤(rùn),腸壁平滑肌層結(jié)

4、構(gòu)紊亂。2.術(shù)后cajal間質(zhì)細(xì)胞的再生情況?免疫組化K1T陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量(個(gè)/400倍鏡下):正常對(duì)照組(16.1±0.93);術(shù)后7天組(1.32±0.21);給藥7天組(1.3±0.17);術(shù)后15天組(2.71±0.29);給藥15天組(1.34±0.11);術(shù)后30天組(6.99±0.98);給藥30天組(6.14±0.82);術(shù)后50天組(11.29±1.42);給藥50天組(8.06±1.14);?免疫熒光K1T陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量

5、(個(gè)/400倍鏡下):正常對(duì)照組(9.49±0.66);術(shù)后7天組(2.28±0.64);給藥7天組(1.41±0.22);術(shù)后15天組(2.41±0.62);給藥15天組(2.23±0.5);術(shù)后30天組(6.19±0.44);給藥30天組(5.56±0.6);術(shù)后50天組(8.31±0.77);給藥50天組(7.72±0.72)。3.肌電活動(dòng)記錄:正常對(duì)照組波幅(31.47±0.84)μV頻率(17.52±0.55)次/min;術(shù)后

6、7天組波幅(25.48±0.74)μV頻率(13.66±0.62)次/min;給藥7天組波幅(22.97±0.62)μV頻率(12.37±1.24)次/min;術(shù)后15天組波幅(30.89±0.78)μV頻率(15.25±0.97)次/min;給藥15天組波幅(29.23±0.66)μV頻率(14.02±0.62)次/min;術(shù)后30天組波幅(31.63±0.56)μV頻率(16.66±0.95)次/min;給藥30天組波幅(31.06

7、±0.85)μV頻率(17.26±0.62)次/min;術(shù)后50天組波幅(31.06±0.9)μV頻率17.25±0.62次/min;給藥50天組波幅(31.28±0.58)μV頻率(16.92±0.48)次/min。
　　結(jié)論:豚鼠行小腸部分切除吻合術(shù)后,能夠減慢腸道的自發(fā)節(jié)律性活動(dòng)。但隨著吻合口的愈合,發(fā)現(xiàn)Cajal間質(zhì)細(xì)胞具有再生的能力,能夠修復(fù)受損細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的延續(xù)性和完整性,腸道自發(fā)節(jié)律性活動(dòng)可以得到恢復(fù)。而且藥物甲磺酸伊馬