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文檔簡介
1、目的:以龍利葉SauropusrostratusMiq.的莖為研究對象,通過對其生藥鑒別、理化鑒別的研究,建立對廣西產(chǎn)龍利葉莖的HPLC指紋圖譜分析方法,為后續(xù)的質(zhì)量標準研究提供科學(xué)依據(jù)。對其水提液的急性毒性和對急性炎癥的抗炎作用進行了藥效學(xué)研究,為臨床藥用和開發(fā)利用藥用資源提供前期的基礎(chǔ)科學(xué)研究。
方法:
(1)采用顯微鑒別對龍利葉莖進行生藥鑒定研究。
(2)采用化學(xué)系統(tǒng)試驗的方法對龍利葉莖中
2、可能存在的成分進行化學(xué)試驗。
(3)采用薄層色譜法對龍利葉莖進行定性鑒別的研究。
(4)采用紫外-可見分光光度法(UV-vis法)分別對其95%乙醇、水、甲醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚提取液進行光譜鑒別的研究。
(5)采用紅外光譜法對10批不同產(chǎn)地的龍利葉莖藥材粉末及浸膏進行光譜定性鑒別。
(6)按照《中國藥典》2010年版一部附錄中提供方法,進行龍利葉莖藥材水分、灰分、浸出物等檢測
3、指標的限量研究。
(7)采用HPLC法對廣西不同產(chǎn)地的龍利葉莖進行指紋圖譜分析,建立廣西產(chǎn)龍利葉莖的HPLC指紋圖譜。
(8)采用改良寇氏法對龍利葉莖的水提取物進行了急性毒性試驗,測定其半數(shù)致死量。
(9)采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性的影響及小鼠棉球肉芽腫等模型,觀察龍利葉莖水提液抗炎作用。
結(jié)果:
(1)龍利葉的莖主要顯微特征是:①木栓層由
4、7~12列細胞,皮層中含有很多淀粉粒,并含有纖維束,韌皮部狹窄,木質(zhì)部寬,射線明顯,髓部大;②粉末可見網(wǎng)紋、螺紋及梯紋導(dǎo)管、伴有含草酸鈣簇晶薄壁細胞,淀粉粒較小,并有纖維等。
(2)系統(tǒng)化學(xué)預(yù)試實驗表明,龍利葉莖藥材中可能含有蛋白質(zhì),氨基酸和多肽,苷類和皂苷,有機酸類,糖類,香豆素和內(nèi)酯,生物堿等化學(xué)成分。
(3)薄層定性鑒別中,用三種不同展開系統(tǒng)展開得到的斑點均與對照藥材有較好的對應(yīng),且三種展開分離效果都較
5、好。
(4)龍利葉莖藥材不同溶劑的提取液在紫外-可見光區(qū)都有特有的吸收峰,特別是石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙醇提取液的特征吸收峰較多、較強。這些特征均具有一定的鑒別意義。
(5)10批龍利葉莖藥材粉末及浸膏的紅外光譜圖相關(guān)系數(shù)都在0.8以上。從整體面貌輔助鑒定龍利葉莖藥材的真實性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。
(6)根據(jù)水分、灰分、熾灼殘渣及浸出物測定,擬規(guī)定龍利葉莖的水分含量不高于9.53%;總灰分含
6、量不高于8.69%;酸不溶性灰分含量不高于0.3%;熾灼殘渣含量不高于13.05%,龍利葉莖的浸出物含量不低于13.96%。
(7)建立廣西龍利葉莖HPLC指紋圖譜:檢測波長為280nm,梯度洗脫,在65min內(nèi)記錄藥材的指紋圖譜。HPLC指紋圖譜標定了14個共有峰。10批龍利葉莖藥材指紋圖譜相似度較好,各批藥材與對照指紋圖譜間的相似度均在0.8以上。
(8)龍利葉莖水提物的LD50為160.55g/kg,L
7、D5095%的可信限155.2~166.07g/kg。
(9)龍利葉莖水提液的高劑量對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和小鼠棉球肉芽腫有明顯的抑制,能降低醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性,中劑量和低劑量對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹及小鼠棉球肉芽腫有抑制作用,但是降低醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性的作用不明顯,說明龍利葉莖的水提液有一定的抗炎作用。
結(jié)論:①對廣西產(chǎn)龍利葉莖進行生藥顯微鑒定、理化鑒別、化學(xué)預(yù)實驗和光譜鑒別研究,
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