雷公藤甲素和雷公藤紅素涂膜劑對(duì)銀屑病小鼠模型的影響.pdf

1、背景:銀屑病是一種常見(jiàn)的慢性復(fù)發(fā)性炎癥性皮膚病，病程長(zhǎng)，易反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重影響患者的身心健康，是國(guó)內(nèi)外皮膚科領(lǐng)域重點(diǎn)研究和防治的疾病之一。1984年全國(guó)流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)人群銀屑病患病率為1.23‰，年新發(fā)病率為0.1‰，即每年新增患者10多萬(wàn)人，而且隨著城市化、工業(yè)化和環(huán)境污染的加重，工作生活壓力的增加，患病人數(shù)還在增多。 雖然局部用藥、光(化學(xué))療法和系統(tǒng)療法為疾病的治療提供了許多個(gè)性化的治療方式，但是，目前尚未有令人滿意

2、的治療方法。多數(shù)患者可采用局部治療，其中維生素D<,3>衍生物和局部外用糖皮質(zhì)激素是一線用藥。UVB光療或光化學(xué)療法(PUVA)可用于局部治療療效不佳的患者，另外甲氨喋呤、維A酸類、環(huán)孢菌素以及近來(lái)發(fā)展起來(lái)的生物療法(如依那西普、英利昔單抗等)都是可供選擇的方法。但這些治療方法不是價(jià)格昂貴就是長(zhǎng)期應(yīng)用有較多的副作用，影響預(yù)后，因此尋找有效的、毒副作用少的治療藥物或治療方法是當(dāng)務(wù)之急。口服雷公藤制劑治療銀屑病有悠久的歷史，療效顯著。但雷公

3、藤制劑的治療劑量與中毒劑量非常接近，其療效與劑量有明顯的量效關(guān)系，服藥劑量增加，藥效作用和毒性也相應(yīng)增加。目前上市的雷公藤制劑有雷公藤總甙片、雷公藤緩釋片、滴丸、雙層片、巴布劑、軟膏、注射劑等。雷公藤發(fā)揮免疫抑制作用的主要成分有多種，其中研究較多的是雷公藤甲素和雷公藤紅素。由于雷公藤制劑的毒副作用，促使人們研究其外用制劑，其中雷公藤甲素已制成軟膏制劑用于臨床并取得顯著療效，但同時(shí)也顯示了明顯的局部刺激性。 涂膜劑是用有機(jī)溶劑溶解

4、成膜材料及藥物而制成的外用劑型，有制備工藝簡(jiǎn)單，不需要特殊設(shè)備；使用時(shí)涂于患處，形成藥膜保護(hù)創(chuàng)面，且耐磨性能好，不易脫落；不需包扎，容易清洗不污染衣物，不需裱背材料，使用方便；膜的形成減少了皮膚表面水分的蒸發(fā)，促進(jìn)了水合作用和溶解角質(zhì)作用，使藥物易透過(guò)角質(zhì)層逐漸釋放藥物，更好地發(fā)揮治療作用等優(yōu)勢(shì)。迄今還沒(méi)有將雷公藤單體制成涂膜劑進(jìn)行研究的報(bào)告，鑒于該種劑型有廣泛的應(yīng)用前景，我們將雷公藤單體制成涂膜劑，并選擇合適的外用濃度，用銀屑病小鼠模

5、型對(duì)其藥效學(xué)進(jìn)行研究，為今后用于臨床提供參考依據(jù)，該藥的外用制劑在皮膚科有廣闊的市場(chǎng)。 他克莫司(FK506)是一種大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑，近年來(lái)的研究表明，它可用于多種皮膚病的治療，其中包括銀屑病。許多資料對(duì)其治療銀屑病的可能機(jī)制進(jìn)行了研究，但尚未見(jiàn)對(duì)銀屑病小鼠模型的研究，在此我們將一并用該模型對(duì)其進(jìn)行藥效學(xué)研究，并與雷公藤外用制劑的作用進(jìn)行比較。 目的:將雷公藤甲素和雷公藤紅素制成涂膜劑，并利用銀屑病小鼠模型對(duì)雷公藤單

6、體涂膜劑和FK506(0.1％)進(jìn)行藥效學(xué)研究，探討其外用治療銀屑病的可能機(jī)制及合適的外用治療濃度。 材料與方法:利用聚乙烯醇(PVA)-124作為成膜材料，將雷公藤單體制成涂膜劑；采用單次給藥同體左右側(cè)對(duì)比法進(jìn)行皮膚刺激性試驗(yàn)選擇合適的試驗(yàn)濃度，將雷公藤甲素和雷公藤紅素分別制成0.001％、0.002％、0.004％和0.02％、0.05％、0.07％各三種濃度的涂膜劑；分別采用小鼠鼠尾鱗片表皮和陰道上皮兩種銀屑病模型，將試驗(yàn)

7、小鼠分成空白組、涂膜劑基質(zhì)組、各濃度雷公藤單體涂膜劑組及FK506(0.1％)外用制劑組，以該小鼠模型陰道上皮有絲分裂狀況和鼠尾鱗片中顆粒層形成狀況作為重要觀測(cè)指標(biāo)，分別取小鼠尾部上皮和陰道組織進(jìn)行常規(guī)組織病理檢查，HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀測(cè)，對(duì)雷公藤單體和FK506進(jìn)行藥效學(xué)研究。 結(jié)果:1、對(duì)小鼠陰道上皮有絲分裂的影響：(1)與空白組比較，基質(zhì)組對(duì)小鼠陰道上皮有絲分裂的影響差異不顯著(t=0.232,p>0.05)；(2)0

8、.1％FK506與空白組比較有顯著型差異(t=10.345,p<0.001)；(3)與基質(zhì)組比較除雷公藤甲素0.001％濃度組(t=2.177，p>0.05)外，余兩濃度(0.002％、0.004％)的雷公藤甲素涂膜劑對(duì)小鼠陰道上皮均有明顯抑制作用(p<0.001)，但兩高濃度雷公藤甲素(O.002％、0.004％)間比較差異不顯著(p>0.05)；(4)與基質(zhì)組比較紅素各濃度組(0.02％、0.05％、0.07％)存在顯著性差異(p<

9、0.001)，但各紅素濃度間比較差異不顯著(F=0.997,p>0.05)；(5)FK506組與甲素0.002％、0.004％組及紅素0.07％組比較差異不顯著(p>0.05)。2、對(duì)小鼠尾部鱗片中顆粒層形成的影響：(1)與基質(zhì)組比較各濃度雷公藤甲素涂膜劑均對(duì)小鼠尾部鱗片中顆粒層形成有促進(jìn)作用(p<0.001)；(2)甲素各濃度間比較存在顯著差異(F=26.532，p<0.001)，甲素0.002％組分別和0.001％、0.004％組比

10、較有顯著型差異，p值分別小于0.01，呈劑量依賴關(guān)系；(3)雷公藤紅素各濃度組與基質(zhì)組比較也顯示了明顯的促進(jìn)顆粒層形成的作用(p<0.001)；(4)紅素0.05％組和0.02％組比較差異顯著(t=3.079,p<0.01)，和0.07％組比較差異不顯著(t=1.828，p>0.05)；(5)FK506組與雷公藤甲素0.004％和紅素0.07％組比較差異無(wú)顯著性(p>0.05)。 結(jié)論:(1)雷公藤甲素、紅素涂膜劑和FK506(