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1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1在表面處理鈦合金種植體骨界面表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究姓名:宋明宇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:李振春20030401IGF—Bl免疫組化染色組:切片常規(guī)脫臘至水,蒸餾水新鮮配制3%雙氧水,室溫10分鐘滅活內(nèi)源性酶,蒸餾水洗3次。熱修復(fù)抗原(切片浸入001M枸櫞酸鹽緩沖液,PH60,電爐加熱至沸騰后斷電,間隔5—10分鐘,反復(fù)2次,冷卻后用PBS洗2次)。加正常山羊血清封閉液,室溫40分鐘
2、,甩去多余液不洗。滴加一抗37℃一小時(shí)左右,一抗為1:200,4。C過(guò)夜,PBS洗2分鐘3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘,PBS洗5分鐘,4次。DAB顯色,5分鐘,蒸餾水洗。蘇木素輕度復(fù)染,脫水,透明,封片。采集TGF—B1的圖像,輸入微機(jī),進(jìn)行圖像分析。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果肉跟觀察組織塊,可見(jiàn)隨時(shí)間推移,種植體與骨組織結(jié)合緊密,表面從無(wú)組織覆蓋,到覆蓋半透明骨膜樣薄膜,再發(fā)展為表面骨組織覆蓋,處理鈦到第6周時(shí),骨組織將金屬完全包
3、埋,好于Ti6A14V組和316L合金組。在HE光鏡下觀察可見(jiàn)處理鈦組和Ti6A14V組隨時(shí)間推移,骨界面從疏松組織包繞至成骨細(xì)胞活躍,類骨質(zhì)樣組織逐漸增多,骨陷窩大而多,血管豐富,骨基質(zhì)逐漸致密,骨小梁連結(jié)增多。處理鈦組略好于Ti6A14V組,而316L合金組主要為纖維組織包繞,類骨質(zhì)出現(xiàn)晚,量少,甚至第6周時(shí)部分種植體周圍完全為纖維組織,即使存在骨組織,細(xì)胞排列也不規(guī)則。免疫組化的結(jié)果觀察到,成骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、類骨細(xì)胞的未分化
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