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文檔簡介
1、浙江大學碩士學位論文轉化生長因子β及其Ⅱ型受體在大腸癌中的表達姓名:鄒瓔申請學位級別:碩士專業(yè):外科學指導教師:何超黃學鋒2001.5.1預后判斷的價值。初步探討大腸癌細胞逃避TGF—B1負調控的可能機制,為進步了解T6F一131和TGF—BR—II在大腸癌形成中的作用提供依據(jù)。1實驗對象標本取自2000年2月至2000年11月浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院肛腸外科手術切除的40例大腸癌組織和癌旁正常組織(遠切緣正常組織,病理證實無腫瘤浸潤
2、)。其中男24例,女16例:平均年齡5665歲。所有病例均經(jīng)病理證實,按1978年我國第一次大腸癌科研協(xié)作會議提出改良Dukes分期:A期10例,B期9例,C期12例,D期9例。2實驗方法21RT—PCR法以TrizolReagent按一步法提取組織總RNA,提取出的RNA經(jīng)凝膠電泳和紫外分光光度計鑒定其質量及含量。逆轉錄合成cDNA,分別PCR擴增TGF—B1和B—actin、TBR—II和B—accin。22電泳和結果觀察PCR產物
3、經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳,在紫外透射儀上觀察,出現(xiàn)160hp(TGF—p1)、224bp(B—actin)、342bp(TBR—11)條帶為目的產物。采用KodakDigitalScienceID圖象分析軟件進行分析,讀取陽性條帶的光密度值,分別計算TGF~B1和TBR—IImRNA指數(shù)(RI),RI=TGF—BlmRNA或TBR—IImRNART—PCR產物光密度值/B—actinmRNART—PCR產物光密度值。3統(tǒng)計學方法以SPSS100
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