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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
分析大鼠永久局灶性腦缺血6h和24h后大腦皮層神經(jīng)元離子通道(Neuronal ion channels)基因表達(dá)變化;探討缺氧預(yù)處理(Hypoxia preconditioning,HPC)對(duì)局灶性腦缺血大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及神經(jīng)元離子通道基因各個(gè)亞型的關(guān)系。
方法:
1.1清潔級(jí)健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠64只(體重:201.483±12.754g),隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組
2、(CB組,8只),單純假手術(shù)組(NF組,8只),單純手術(shù)組(NM組,20只),缺氧預(yù)處理組(HB組,8只),缺氧預(yù)處理+手術(shù)組(HM組,20只);其中NM組、HM組又分別分為永久性大腦中動(dòng)脈閉塞(permanent middle cerebral artery occlusion,PMCAO)后6h,24小時(shí)兩個(gè)亞組,每個(gè)亞組10只,HB組也分為6h,24h兩個(gè)亞組,每組4只。
1.2 HB和HM組動(dòng)物連置于模擬海拔5000m
3、低壓氧艙3天,同一時(shí)間段每天2小時(shí)。
1.3 NM和HM組動(dòng)物制作PMCAO模型。假手術(shù)組行手術(shù)通路,但不插線栓。
1.4參照Longa5分法對(duì)PMCAO后6小時(shí)和24小時(shí)后大鼠行神經(jīng)功能評(píng)分。
1.5用2%TTC染色法計(jì)算腦梗塞面積。
1.6 RT2PCR Arrays分析各組離子通道基因表達(dá),篩選有差異性表達(dá)基因,針對(duì)每個(gè)基因進(jìn)行分析。
結(jié)果:
1.同一時(shí)間點(diǎn)HM組大鼠的神
4、經(jīng)功能評(píng)分明顯輕于單純手術(shù)組(P<0.05);
2.同一時(shí)間點(diǎn)HM組大鼠腦梗塞面積明顯小于對(duì)照組(P<0.05)。
3. RT2PCR Arrays分析示:缺血后6小時(shí),單純梗塞組比缺氧預(yù)處理組表達(dá)上調(diào)的基因有29個(gè)。其中Kcnj15的上調(diào)最為明顯。缺血后24小時(shí),單純梗塞組比缺氧預(yù)處理組表達(dá)上調(diào)的基因有:Trpc3。表達(dá)下調(diào)的基因有11個(gè)。其中Cacng4和Kcnj4的差異性較明顯。
結(jié)論:
1
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