不同類型應(yīng)激狀態(tài)下小鼠的非特異性免疫變化及其與H2基因的多態(tài)性關(guān)聯(lián).pdf

1、嚴(yán)重創(chuàng)傷時(shí)機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)的研究一直是人們關(guān)注的重點(diǎn),而應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致的繼發(fā)性損害的個(gè)體差異很大,該文旨在于探討應(yīng)激免疫變化與遺傳的關(guān)系,并找出有關(guān)調(diào)控基因,證明此類調(diào)控基因控制個(gè)體的應(yīng)激免疫.該文設(shè)計(jì)了束縛應(yīng)激(傾向于精神性應(yīng)激和慢性應(yīng)激)狀態(tài)下和熱應(yīng)激(傾向于軀體性應(yīng)激和急性應(yīng)激)狀態(tài)下的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),通過碳粉廓清試驗(yàn)(Charcoal Clearance Assay,CCA)測(cè)定這些昆明小鼠(KM mice)對(duì)異物碳粉的吞噬作用來了解整個(gè)單

2、核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的功能和通過放射免疫技術(shù)(Radioimmunoassay,RIA)測(cè)定小鼠血清中皮質(zhì)醇(cortisol)的水平來了解小鼠處于應(yīng)激的狀態(tài),同時(shí)采用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)技術(shù)檢測(cè)它們的遺傳多態(tài)性,再通過統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法計(jì)算應(yīng)激免疫和遺傳的關(guān)系.該試驗(yàn)選用H2Eb位點(diǎn)對(duì)昆明(KM)小鼠進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)并分析其與碳粉廓清率水平的關(guān)系.根據(jù)已報(bào)道的Mus musculus domes

3、ticus(西歐家鼠)H2-Eb位點(diǎn)第二個(gè)外顯子的核酸序列,該試驗(yàn)設(shè)計(jì)了2組序列特異性引物(分別稱為MudoEb5、MudoEb7),并以小鼠腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNFα)作為PCR擴(kuò)增的陽性內(nèi)部參照.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,53只小鼠中,所有PCR的內(nèi)參條帶全部出現(xiàn),MudoEb5檢測(cè)陽性的有27只(50.94﹪),MudoEb7檢測(cè)陽性的有37只(69.81﹪),即總共檢出的等位基因數(shù)目有64個(gè),其

4、中MudoEb5和MudoEb7同時(shí)檢出的有17只(16.04﹪).同時(shí),組間檢驗(yàn)分析顯示:束縛組較對(duì)照組的吞噬指數(shù)有明顯的下降(P<0.005),但束縛組較對(duì)照組的血清皮質(zhì)醇略有升高,但是無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);熱應(yīng)激組較對(duì)照組的吞噬指數(shù)有明顯的下降(P<0.05)且熱應(yīng)激組較對(duì)照組的血清皮質(zhì)醇有顯著性升高.MudoEb5與應(yīng)激免疫的無相關(guān)性(P>0.05),MudoEb7與應(yīng)激免疫的相關(guān)(P<0.05).以上結(jié)果提示:在不同類