參苓白術散對脾虛證小鼠血清蛋白質組的影響.pdf

1、目的：①以科學的方法建立可靠的小鼠脾虛證動物模型。
　?、谟肧DS-PAGE技術對小鼠血清蛋白質組進行初步分析。
　?、鄄捎秒p向凝膠電泳（2-DE）技術分析正常對照組（以下統(tǒng)稱正常組）、脾虛模型組（以下統(tǒng)稱模型組）、參苓白術散低劑量組（以下統(tǒng)稱低量組）和參苓白術散高劑量組（以下統(tǒng)稱高量組）血清的二維凝膠圖譜，對治療后表達差異明顯的蛋白點進行基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜（MALDI-TOF-MS）鑒定分析。
　　方法

2、：①采用利血平單因素造模法建立脾虛證小鼠動物模型，觀察各組小鼠一般情況、體重和飲食量的改變，并采用比色分析法及ELISA法分別測定各組小鼠血清D-xylose及Gastrin的含量進行驗證。
　?、谕ㄟ^SDS-PAGE技術對各組血清進行分離,建立正常組、脾虛模型組、參苓白術散藥物組電泳圖譜。利用Quantity One圖像分析軟件對各組圖譜進行對比分析,觀察其改變。
　?、鄯謩e收集正常組、模型組、高量組和低量組的血清樣本，對

3、樣本處理后分別進行雙向凝膠電泳，并利用PDQuest8.0圖像分析軟件對2-DE圖譜進行差異性分析。選取差異明顯的蛋白點進行基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜鑒定，檢索數(shù)據(jù)庫鑒定蛋白質。
　　結果：①成功建立了可靠的的脾虛證動物模型。
　?、趯π∈笱宓鞍踪|組SDS-PAGE圖譜進行分析后，三個組分離均得到20個條帶，脾虛模型組與正常組相比,脾虛模型組有7個條帶表達增強，3個條帶表達減弱，參苓白術散藥物組均能使脾虛組高表達的7

4、個條帶和低表達的3個條帶恢復到正常水平或趨于正常水平。
　　③經過比較分析四組血清電泳圖譜，有明顯差異的蛋白點有35個，對其中10個差異點進行質譜鑒定，成功鑒定出6種蛋白，分別為:beta-globin、vitamin D-binding protein、pregnancyzone protein、apolipoprotein A-I、apolipoprotein A-IV和albumin。
　　結論：①采用利血平單因素建立