羅非魚凡隆氣單胞菌病的病理學(xué)特性及環(huán)境對發(fā)病的影響.pdf

1、為了探討環(huán)境因子對由凡隆氣單胞菌引起的羅非魚運動氣單胞菌敗血癥(簡稱MAS)發(fā)生的影響，本研究綜合應(yīng)用了細(xì)菌分離鑒定技術(shù)、組織病理學(xué)技術(shù)、免疫組織化學(xué)技術(shù)、電鏡技術(shù)、ELISA和PCR等技術(shù)研究了羅非魚凡隆氣單胞菌病的病理學(xué)特性及環(huán)境對發(fā)病的影響。結(jié)果如下： 患出血性敗血癥羅非魚自然病例的臨床癥狀、大體剖檢變化和組織病理學(xué)調(diào)查結(jié)果提示病原可能為氣單胞菌的成員。水環(huán)境對MAS發(fā)病的調(diào)查結(jié)果顯示臨床的水溫升高(從17℃升到30℃)、

2、低溶氧(低于3mg/L)、高氨氮(高于2.5mg/L)、高亞硝酸氮(大于0.4mg/L)和高有機物濃度(高于30mg/L)的池水更容易誘發(fā)羅非魚的氣單胞菌敗血癥。 本研究在國內(nèi)首次通過形態(tài)學(xué)、生理生化特性和16SrDNA高變區(qū)鑒定了從典型病例分離的病原為凡隆氣單胞菌溫和生物型，并在Genbank注冊了4個16SrDNA高變區(qū)。凡隆氣單胞菌溫和生物型占分離株的95.6％，且以弱毒株為主(68.4％)。臨床分離的弱毒代表株—凡隆氣單

3、胞菌溫和生物型BJCP-5(簡稱BJCP-5)成功地復(fù)制出MAS。BJCP-5分泌的26KDa的具有溶血活性、細(xì)胞毒性和腸毒性的外毒素是重要的毒力因子。 以BJCP-5為模式株研究了環(huán)境因子對細(xì)菌毒力(包括生長生存、黏附、產(chǎn)溶血素、侵染和致動物死亡能力)和羅非魚免疫機能(包括血清殺菌活性、血細(xì)胞吞噬能力和血清抗體凝集效價)的影響，結(jié)果表明臨床發(fā)病的高溫、低溶氧、高氨氮和高亞硝酸氮、發(fā)病池水及細(xì)菌初始定植點的營養(yǎng)條件不同程度地提高

4、了細(xì)菌毒力和抑制了宿主防御機能。該結(jié)果首次系統(tǒng)地為凡隆氣單胞菌溫和生物型的條件致病性提供了直接的理論依據(jù)，為羅非魚凡隆氣單胞菌敗血癥的環(huán)境控制提供了參考。 為了尋找能用于魚類的新型促生長劑和抗感染劑，探討了兩種植物寡糖(葡苷寡糖和半乳甘露寡糖)和三種動物(雞、豬和兔)腸道抗菌肽對幼齡羅非魚生長和BJCP-5感染的效應(yīng)，結(jié)果表明五種測試物以100mg/kg劑量伴料投喂對幼年羅非魚有促生長和增加對BJCP-5感染的抗性的作用，且抗黏