兩種泥鰍的染色體組操作.pdf

1、染色體組操作主要包括多倍體的人工誘導(dǎo)、雌核發(fā)育和雄核發(fā)育等，它在育種中占有重要地位，已成為魚(yú)類育種的熱點(diǎn)。為了便于對(duì)泥鰍和大鱗副泥鰍的染色體組操作，本實(shí)驗(yàn)利用Olympus解剖鏡對(duì)其胚胎發(fā)育過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)的觀察、拍攝和記錄。結(jié)果表明：在26℃發(fā)育條件下，兩種泥鰍的胚胎發(fā)育過(guò)程基本相同，但胚胎發(fā)育的速度相差較大，從受精到眼黑色素期泥鰍約需要30h，大鱗副泥鰍約需要37.5h。 采用熱休克抑制受精卵第一次卵裂的方法誘導(dǎo)四倍體泥鰍，發(fā)現(xiàn)

2、熱休克誘導(dǎo)四倍體泥鰍的最佳條件是：在受精后20分鐘左右采用41℃熱休克處理泥鰍受精卵4分鐘。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用熱休克法誘導(dǎo)多倍體和Ag-NOR法檢測(cè)多倍體簡(jiǎn)單易行，便于推廣。 利用鯉魚(yú)精子分別激發(fā)兩種泥鰍的胚胎發(fā)育，采用冷休克法使染色體組加倍誘導(dǎo)兩種泥鰍的雌核發(fā)育二倍體魚(yú)。結(jié)果表明：在泥鰍和大鱗副泥鰍中，均采用0℃在受精后5分鐘持續(xù)處理30分鐘的條件下獲得雌核發(fā)育二倍體的效果最好。 用從20個(gè)隨機(jī)引物中篩選出的7個(gè)引物對(duì)

3、泥鰍和大鱗副泥鰍及其自交與雜交子代進(jìn)行了RAPD遺傳穩(wěn)定性分析。結(jié)果表明：RAPD譜帶主要呈孟德?tīng)柺竭z傳，在泥鰍自交組合中為99.11％，在大鱗副泥鰍中是100％，在雜交組合中是99.36％；極少數(shù)存在異常分離現(xiàn)象，在泥鰍自交組合中為0.89％且該類帶紋明亮穩(wěn)定，在雜交組合中為0.64％且該類帶紋較暗穩(wěn)定性差。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明在泥鰍中親子代間RAPD譜帶具有較高的遺傳穩(wěn)定性。 在分析了RAPD標(biāo)記在兩種泥鰍中的遺傳穩(wěn)定性的基礎(chǔ)上，對(duì)

4、兩種泥鰍雌核發(fā)育胚胎發(fā)育不同時(shí)期、子代及其各自親本基因組DNA進(jìn)行RAPD分析。在雌核發(fā)育泥鰍中，子代與父本遺傳相似度為0.458，與母本遺傳相似度為0.75，父本特有率為0.212，在雌核發(fā)育大鱗副泥鰍中依次為0.323、0.889、0.065。在泥鰍的胚胎雌核發(fā)育中，胚胎發(fā)育的5個(gè)時(shí)期與父本遺傳相似度平均為0.403，與母本遺傳相似度平均為0.587，父本特有率平均為0.195，在大鱗副泥鰍的胚胎雌核發(fā)育中依次為0.563、0.72