G-2407-3鼻腔噴霧劑的研究.pdf

1、目的:本文以G-2407-3為模型藥物,根據(jù)該藥的理化性質(zhì)、藥理作用和鼻腔給藥特點(diǎn),制備一種使用方便、起效迅速、生物利用度高、安全性好的鼻腔給藥劑型,為該藥的臨床應(yīng)用增加一種劑型選擇。
　　內(nèi)容與方法:考察了pH值對(duì)G-2407-3穩(wěn)定性的影響以及給藥裝置的密閉性和噴量的準(zhǔn)確性;通過離體羊鼻黏膜體外吸收實(shí)驗(yàn),以滲透速率比較評(píng)價(jià)了幾種促滲劑及其不同濃度下的促滲效果,選擇了最佳促滲劑及其用量;以離體蟾蜍上腭纖毛毒性實(shí)驗(yàn)對(duì)幾種輔料進(jìn)行了

2、毒性評(píng)價(jià),并考察了pH值對(duì)纖毛運(yùn)動(dòng)的影響,用兔眼進(jìn)行黏膜刺激性評(píng)價(jià),結(jié)果為其鼻粘膜提供佐證;進(jìn)行了G-2407-3鼻噴劑工藝研究,并建立了鼻腔噴霧劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案;又通過穩(wěn)定性研究考察了該制劑的包裝儲(chǔ)存條件,為包裝選擇提供依據(jù),并考察了其穩(wěn)定性。采用熱板法進(jìn)行了小鼠的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn),最后采用比格犬進(jìn)行了藥代動(dòng)力學(xué)和相對(duì)生物利用度研究。
　　結(jié)果:首先在G-2407-3的處方前研究中,建立了精密、靈敏、專屬性強(qiáng)的G-2407-3HPLC

3、測(cè)定方法,結(jié)合國內(nèi)外上市的G-2407-3片劑規(guī)格,確定鼻噴劑的規(guī)格為25mg/100μL/噴。通過藥物溶液在不同pH條件下的穩(wěn)定性研究,確定處方的pH范圍5.5～8.0。接著對(duì)G-2407-3鼻腔給藥系統(tǒng)的處方與工藝進(jìn)行了優(yōu)化。以羊鼻黏膜為動(dòng)物模型,以滲透速率和累積滲透量為指標(biāo),通過鼻腔吸收體外實(shí)驗(yàn)考察,發(fā)現(xiàn)了了三種吸收促進(jìn)劑的促滲效果。結(jié)果顯示三種吸收促進(jìn)劑均有促滲作用,其中以吸收促進(jìn)劑A和B促滲效果最好,增滲倍數(shù)分別為5.2和4.

4、9倍;在此基礎(chǔ)上,又進(jìn)一步考察了二者在不同濃度下的促滲效果,隨著促滲劑濃度的增加,增滲倍數(shù)也增加,但濃度與增滲倍數(shù)之間沒有線性關(guān)系,而是當(dāng)濃度增加到一定值后,對(duì)主藥的促滲作用達(dá)到了飽和現(xiàn)象。吸收促進(jìn)劑A和B二者的促滲效果相差不大,結(jié)合纖毛毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果,發(fā)現(xiàn)A對(duì)纖毛的毒性要明顯小于B。故最終我們選擇2.5％的A作為G-2407-3鼻腔噴霧劑的吸收促進(jìn)劑。由于G-2407-3鼻腔噴霧劑為多次給藥的制劑,參照文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)噴霧劑的抑菌劑進(jìn)行了篩選

5、,選擇0.3％三氯叔丁醇作為抑菌劑。優(yōu)化確定了制劑的處方及工藝,之后確定了G-2407-3鼻腔噴霧劑所采用的給藥裝置,并考察了給藥裝置的密閉性,在此基礎(chǔ)上完成了制劑的質(zhì)控和穩(wěn)定性研究。
　　在對(duì)制劑安全性的研究中,研究了包括藥物、輔料、pH值及最終制劑對(duì)鼻黏膜的毒性。采用離體蟾蜍上顎黏膜對(duì)纖毛毒性的影響因素進(jìn)行了考察,研究表明,隨G-2407-3濃度的增加,對(duì)纖毛毒性增加,并確定了該鼻噴劑應(yīng)用HCl調(diào)節(jié)pH,防腐劑為0.3％三氯叔

6、丁醇。同時(shí)發(fā)現(xiàn)加入2.5％A后三氯叔丁醇的毒性減小,提示促滲劑 A對(duì)三氯叔丁醇的纖毛毒性具有一定的保護(hù)作用。250mg·mL-1的G-2407-3鼻噴劑對(duì)纖毛運(yùn)動(dòng)有一定影響,但毒性不大,經(jīng)生理鹽水淋洗后,纖毛均可恢復(fù)擺動(dòng),且擺動(dòng)時(shí)間較長,說明對(duì)纖毛的毒性是可逆的。本文又考察了pH值對(duì)纖毛運(yùn)動(dòng)的影響,結(jié)果表明:pH值在4-8范圍內(nèi)對(duì)纖毛損傷較小,可認(rèn)為是安全的pH范圍。其次,采用了在體蟾蜍上顎黏膜法考察了制劑的在體毒性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與離體法結(jié)

7、果基本一致,說明該制劑對(duì)纖毛的毒性是可逆的。為了更為準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)制劑的刺激性,選用兔眼模型考察G-2407-3鼻腔噴霧劑的鼻黏膜刺激性,是考慮到兔眼可以比較直觀的表現(xiàn)出刺激的癥狀,如流淚、充血等,而且實(shí)驗(yàn)方便,通過此實(shí)驗(yàn)為鼻腔的刺激性實(shí)驗(yàn)提供佐證。本實(shí)驗(yàn)選擇的動(dòng)物模型為新西蘭大耳白兔,結(jié)果顯示該制劑對(duì)黏膜基本無刺激。根據(jù)以上安全性研究的結(jié)果,確定了G-2407-3鼻腔噴霧劑的毒性影響因素,并表明該制劑安全,對(duì)鼻黏膜無毒無刺激性。
　

8、　研究建立的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),能較好的控制本劑型的質(zhì)量,三批所制備的樣品質(zhì)量良好。建立穩(wěn)定性分析方法,其方法準(zhǔn)確、可靠、分解產(chǎn)物均不干擾本法對(duì)主藥的測(cè)定。初步穩(wěn)定性結(jié)果表明該制劑性能穩(wěn)定:影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)3個(gè)月和室溫長期留樣試驗(yàn)3個(gè)月G-2407-3鼻腔噴霧劑的外觀、含量、pH值等均未發(fā)生明顯變化,其穩(wěn)定性研究有待進(jìn)一步考察。
　　藥效學(xué)研究中分別對(duì)其進(jìn)行量效關(guān)系和時(shí)效關(guān)系的研究,量效實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著給藥劑量的增大藥效會(huì)明顯增強(qiáng),

9、且鼻腔給藥的起效快,同樣劑量下鼻腔給藥與灌胃混懸液相比,鼻腔給藥的藥效大于灌胃混懸液。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,兩種給藥途徑均有效且沒有差別,各個(gè)時(shí)間點(diǎn)指標(biāo)值藥效差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,時(shí)效關(guān)系表明G-2407-3鼻腔噴霧劑起效比混懸液灌胃給藥快。
　　建立了測(cè)定G-2407-3比格犬血漿中藥物濃度的HPLC方法,對(duì) G-2407-3片劑和鼻腔噴霧給藥后比格犬的血藥濃度進(jìn)行了測(cè)定,并對(duì)其體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程進(jìn)行了分析,比較了兩種給藥途徑的達(dá)峰時(shí)間和生物利

10、用度。研究結(jié)果經(jīng)方差分析,tmax、AUC0-1440min和AUC0-∞在參比制劑和受試制劑之間均有顯著性差異(P<0.05)。G-2407-3鼻噴劑和片劑的體內(nèi)過程均符合二室模型,Tmax為(17.50±8.66)min,比片劑快約2.6倍;Cmax為(15.42±4.34)mg·L-1,約是片劑的2倍;t1/2β為(686.29±504.06)min,其相對(duì)生物利用度為(175.98±35.04)％。研究結(jié)果表明鼻腔給藥生物利用度