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1、目的:通過建立模型癡呆兔,觀察模型癡呆兔行為學(xué)和腦內(nèi)海馬區(qū)VEGF的表達(dá),研究電針對(duì)模型癡呆兔行為學(xué)和海馬VEGF表達(dá)的影響,觀察電針對(duì)AD是否有治療作用,探討電針治療AD的作用機(jī)理,為電針對(duì)腦神經(jīng)元保護(hù)作用及促進(jìn)腦細(xì)胞的損傷修復(fù)和再生的神經(jīng)提供生化依據(jù),為針灸治療AD提供理論支持和有效治療方法。
方法:
1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組:健康日本大耳白兔40只,體重2.5±0.5kg,雌雄各半,第一次行為學(xué)測(cè)試后隨機(jī)分為
2、(A)空白組;(B1)手術(shù)組;
2、模型的制作:(B1)組采用鋁中毒復(fù)制動(dòng)物模型,即在白兔的項(xiàng)背部每日注射2.5%氯化鋁溶液1ml/kg,共20天。若出現(xiàn)動(dòng)物反應(yīng)遲鈍,靈敏度降低,即可視為造模成功,造模成功后進(jìn)行第二次行為學(xué)測(cè)試并將手術(shù)組隨機(jī)分為(B)模型組;(C)電針治療組;(D)腦復(fù)康組。
3、治療方法:空白對(duì)照組不做任何處理;(B)模型對(duì)照組造模后每天抓取灌胃生理鹽水;(C)電針治療組選取懸鐘、腎俞、脾
3、俞、豐隆四穴,采用電針治療,用0.25mm×25mm 毫針針刺,疏密波,頻率為18-20Hz,每次15min;(D)西藥組采取腦復(fù)康灌胃治療,224mg/kg/d,連續(xù)治療5天,休息兩天,為一療程,共5個(gè)療程。治療完畢后進(jìn)行第三次行為測(cè)試。
4、標(biāo)本收集及指標(biāo)檢測(cè):將模型癡呆兔斷頭處死后快速取出腦組織,剝離海馬,立即放入10%甲醛溶液和經(jīng)DEPC 水處理過的10%的甲醛溶液中固定,分別采取免疫組化法和原位雜交法,檢測(cè)VEG
4、F的表達(dá)。
結(jié)果:
1、各組日本大耳白兔的精神狀態(tài)的表現(xiàn):和A組比較,造模后B、C、D三組的大耳白兔均出現(xiàn)精神萎靡,神情呆滯,動(dòng)作遲緩,反應(yīng)遲鈍,進(jìn)食減少,體重減輕,咬架現(xiàn)象減少等現(xiàn)象,經(jīng)治療后C、D兩組上述現(xiàn)象有所改善,B組表現(xiàn)同前。
2、各組日本大耳白兔行為學(xué)測(cè)試結(jié)果:與空白相比,模型組的學(xué)習(xí)記憶能力顯著降低;與模型對(duì)照組比較各治療組白兔的學(xué)習(xí)記憶能力顯著改善。
3、VEGF免
5、疫組化結(jié)果模型組與空白組比較,兔腦內(nèi)VEGF表達(dá)明顯升高(P<0.05);治療后,電針組與藥物組兩組兔腦內(nèi)VEGF表達(dá)較模型組明顯升高(P<0.01),電針組與藥物組比較無顯著性差異(P>0.05)。
4、VEGF原位雜交結(jié)果模型組與空白組比較,兔腦內(nèi)VEGF表達(dá)明顯升高(P<0.05);治療后,電針組與藥物組兩組兔腦內(nèi)VEGF表達(dá)較模型組明顯升高(P<0.05),電針組與藥物組比較無顯著性差異(P>0.05)。
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