栗疫病菌群體遺傳結構及其突變菌株的生物學特征.pdf

1、栗疫病(Chestnut blight)是栗屬(Castanea)植物上最常見、最重要的病害，也是世界著名的森林病害之一。本文對栗疫病菌的群體結構進行了研究。 本研究用標準交配型菌株對中國東部11個省的114個栗疫病菌進行了交配型測定，結果表明，只要條件適宜，各種植區(qū)栗疫病菌均可以形成有性階段的子囊殼。本研究克隆了我國栗疫病菌菌株133和293的MAT-1交配型的部分基因，序列分析表明，133和293菌株與GeneBank的MA

2、T-1的序列同源性為94％和97％。用PCR技術對中國東部栗疫病菌交配型進行了快速分子測定，結果發(fā)現(xiàn)MAT-1和MAT-2菌株各占50％，多數(shù)種植區(qū)栗疫病菌同時存在MAT-1、MAT-2兩種交配型；用分子測定不同子囊殼栗疫病菌子囊孢子后代的交配型分離情況多數(shù)分離比為1:1。分子測定與生物學測定交配型結果吻合的有87個菌株，占75.7％；不吻合的有26株，占22.6％。結果提示有性雜交導致栗疫病菌的遺傳變異仍然是栗疫病菌遺傳多樣性的重要原

3、因。 采用RAPD方法對來源于栗疫病菌8個不同子囊殼的子囊孢子后代和無性生殖的對照群體各23個菌株進行了群體結構的比較。從RAPD(random amplified DolymorphicDNA)隨機引物中篩選出擴增多態(tài)性豐富的4條引物，共擴增出條帶73條，多態(tài)性檢測率為100％。研究結果表明，在8個子囊殼和無性生殖群體中的基因多樣性，64.27％由群體內部引起，只有35.73％的多樣性由群體之間的基因差異引起。各子囊殼群體間存

4、在的基因流動很小(Nm=0.8994)。有性群體和無性群體之間的遺傳距離為0.1389，基因流動值為3.4212，說明子囊殼群體和無性生殖群體之間可能存在一定的關系。分析表明栗疫病菌子囊孢子后代在自然界的傳播對自然界病菌的多樣性起重要的作用。 利用紫外誘變方法得到了栗疫病菌的突變體菌株。突變體菌株和初始菌株相比，在生長速度、產生分生孢子數(shù)量、色素的產生、代謝相關的酶及致病性上都有明顯的差異。在含有0.5％單寧酸的馬鈴薯培養(yǎng)基(P