中國棗和酸棗種質(zhì)資源的AFLP標(biāo)記研究.pdf

1、棗樹原產(chǎn)于我國，栽培歷史悠久，分布范圍廣泛，品種資源豐富。然而，迄今尚未建立統(tǒng)一、完善的棗種質(zhì)資源分類鑒定技術(shù)體系，給棗的研究和生產(chǎn)帶來諸多的問題。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用AFLP技術(shù)探討了棗種質(zhì)資源的分類鑒定新體系，主要結(jié)果如下：一、棗樹組織中多糖類物質(zhì)會嚴(yán)重干擾基因組DNA提取的質(zhì)量。本研究比較了常規(guī)CTAB法、TE3D法和改良CTAB法三種方法的提取效果。結(jié)果表明：常規(guī)CTAB法提取DNA難以去除植物組織中的多糖類雜質(zhì)；TE3D法提取DNA多糖

2、雜質(zhì)少，但產(chǎn)率低，易降解，褐化嚴(yán)重；改良CTAB法提取DNA無明顯降解，雜質(zhì)少，A260/A280比值約為1.80，通過基因組DNA-AFLP指紋圖譜分析，能夠完全滿足實(shí)驗(yàn)要求。 二、應(yīng)用優(yōu)化的棗樹AFLP技術(shù)體系，從32對EcoRⅠ和MseⅠ引物組合中篩選出了5對多態(tài)性高、條帶多、帶型分布均勻的引物組合，并利用這5對引物對206份品種進(jìn)行了AFLP分析。共得到了213條擴(kuò)增帶，即對棗核酸序列上的213個基因組位點(diǎn)進(jìn)行了檢測，其

3、中多態(tài)性帶175條，多態(tài)性百分率達(dá)80.75％。除玉田小棗和滄縣小棗可能為同物異名現(xiàn)象未能分開外，其他品種全部被分開，表明AFLP技術(shù)是鑒定中國棗種質(zhì)資源的有效方法。 三、根據(jù)指紋圖譜計(jì)算各品種間單匹配系數(shù)(SM)，按照不加權(quán)算術(shù)平均值法(UPGMA)繪制棗品種親緣關(guān)系樹狀圖。從聚類圖上在相似系數(shù)0.70處所有品種分為2大類群，第1類全部為棗品種，第2類為酸棗及酸棗和棗之間的過渡品種。在相似性系數(shù)值為0.84處，將供試棗樹品種分