吉首鉀長(zhǎng)石礦區(qū)土壤中固氮細(xì)菌的選育.pdf

1、我國(guó)作為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)大國(guó)，每年需消耗大量的工業(yè)氮肥，工業(yè)氮肥的使用會(huì)造成農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)下降、土壤板結(jié)、水體富營(yíng)養(yǎng)化、生產(chǎn)成本增加等一系列問(wèn)題，而微生物復(fù)合肥料能解決這些問(wèn)題，所以，選育高效率的微生物固氮菌株對(duì)發(fā)展可持續(xù)綠色農(nóng)業(yè)具有重要的意義。
　　為了得到高效固氮菌，在吉首鉀長(zhǎng)石礦區(qū)采集土壤樣品，采用純培養(yǎng)方法從中分離、篩選得到具有較強(qiáng)固氮能力的細(xì)菌28株。對(duì)28株細(xì)菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，生理生化鑒定，以及采用分子生物學(xué)手段進(jìn)行16S rRN

2、A序列分析，發(fā)現(xiàn)28株細(xì)菌別屬于8個(gè)科，10個(gè)屬，其中11株菌為根瘤菌屬，6株菌為芽胞桿菌屬，表明從鉀長(zhǎng)石礦區(qū)土壤中分離獲得的固氮菌具有較好的多樣性，根瘤菌為優(yōu)勢(shì)種群。分別從每個(gè)屬中選取生長(zhǎng)狀況較好的菌株作為代表菌株，通過(guò)發(fā)酵和凱氏定氮法測(cè)定，發(fā)現(xiàn)各屬代表菌株的固氮能力存在較大差異，根瘤菌和芽孢桿菌屬代表菌株的固氮能力最強(qiáng)，其中根瘤菌代表菌株L13的96h發(fā)酵液氮含量達(dá)到10.71 mg/L，其次是芽孢桿菌代表菌株L10。
　　為

3、了能夠更好的了解和掌握菌株L13和L10的生長(zhǎng)特性，對(duì)菌株L13和L10生長(zhǎng)的溫度、pH、滲透壓、不同碳源等因子對(duì)固氮能力的影響進(jìn)行了比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩株細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖的各個(gè)時(shí)期都存在較大差異，相比L10，L13的遲滯期和對(duì)數(shù)期較L10短，但是L13的平穩(wěn)期較L10長(zhǎng)，因此可以認(rèn)為，L13的生長(zhǎng)繁殖速度較L10快，而且對(duì)于環(huán)境的耐受性也較L10強(qiáng)。
　　為進(jìn)一步改良所篩選的高能固氮菌，對(duì) L13分別采用了紫外照射誘變和亞硝基胍進(jìn)行