金鐵鎖愈傷組織細(xì)胞主要色素形成的基本條件研究.pdf

1、隨著組織培養(yǎng)技術(shù)在植物中的應(yīng)用日益廣泛，將其用于生產(chǎn)植物次生代謝產(chǎn)物的研究也越來越深入。本研究以珍稀瀕危中藥材金鐵鎖（Psammosilene tunicoides W. C. Wu et C. Y. Wu）為試驗(yàn)材料，研究不同培養(yǎng)條件對(duì)金鐵鎖愈傷組織誘導(dǎo)增殖和次生代謝產(chǎn)物色素積累的影響，并對(duì)金鐵鎖色素進(jìn)行初步分離鑒定。一方面為該珍稀種質(zhì)資源的保護(hù)和充分利用提供新的思路，另一方面明確金鐵鎖愈傷組織細(xì)胞色素的主要成分，為實(shí)際生產(chǎn)中開發(fā)利用

2、天然、安全的植物色素提供新的途徑。主要結(jié)果與結(jié)論如下：
　　1.采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，研究不同的消毒組合、不同的培養(yǎng)條件對(duì)金鐵鎖種子的萌發(fā)率及不同外植體（莖、葉及芽）對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)增殖的影響。結(jié)果表明：將種子分別置于75％乙醇中75 s、0.1%高錳酸鉀溶液中30 s及0.5%升汞中15 min消毒處理后進(jìn)行萌發(fā)，得到的種子萌發(fā)率高，且污染率較其他處理低。芽誘導(dǎo)愈傷組織效果比莖及葉較好，且適宜的激素組合為0.2 mg·L-12,4

3、-D和0.5 mg·L-16-BA，在此條件下誘導(dǎo)出的白色愈傷組織生長(zhǎng)良好，可為進(jìn)一步誘導(dǎo)積累色素提供充分的實(shí)驗(yàn)材料。
　　2.通過比較不同培養(yǎng)條件下金鐵鎖愈傷組織生物量及色素產(chǎn)量的不同，篩選出利于愈傷組織增殖且色素合成的培養(yǎng)條件，結(jié)果表明：在基本培養(yǎng)基MS中同時(shí)添加1.5 mg·L-1 NAA和0.5 mg·L-16-BA時(shí)色素產(chǎn)量較高，優(yōu)于單獨(dú)添加NAA和6-BA的情況。此外，2,4-D處理對(duì)色素的積累有著明顯的抑制作用，IB

4、A對(duì)色素的誘導(dǎo)無明顯影響，采用1.5 mg·L-1的IAA也可誘導(dǎo)少量色素；MS和White培養(yǎng)基較其他培養(yǎng)基相比色素誘導(dǎo)積累效果更好，其適宜的培養(yǎng)條件為25℃、2000 lx和pH5.8。
　　3.通過對(duì)金鐵鎖愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生的色素進(jìn)行初步提取鑒定和穩(wěn)定性分析。在不同的色素提取及分離條件下，其提取分離效果有所不同，結(jié)果表明：在30℃時(shí)使用2%鹽酸-甲醇溶液（溶劑料液比為1:10（g:mL））提取20 h，此條件下的色素提取效果較