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文檔簡介
1、我國是食管癌相對高發(fā)的國家,同時也是食管癌死亡率最高的國家。食管癌已經(jīng)嚴重威脅到我國人民的健康。如何實施早期食管癌的診斷和晚期食管癌的化療是困擾臨床醫(yī)生的難題。對于食管癌發(fā)病機理的研究將為食管癌的早期診斷和治療提供理論依據(jù)。目前,利用分子生物學技術(shù),從基因水平探索腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及治療是腫瘤研究的熱點。正常細胞處于增殖和死亡的平衡狀態(tài),腫瘤細胞的一個顯著特性就是無限增殖。腫瘤和細胞死亡密切相關(guān)。因此研究腫瘤細胞的死亡就成為腫瘤研究
2、的熱點。自噬、凋亡、壞死是細胞死亡的三種形式。細胞凋亡是由Caspase(天冬氨酸特異性的半胱氨酸蛋白水解酶)介導的,以凋亡小體形成為特點的程序性細胞死亡,被稱為1型細胞死亡;自噬是非Caspase介導的,以自噬體形成為特點的程序性細胞死亡,被稱為Ⅱ型細胞死亡。最近研究表明自噬活性的改變與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。自噬是一系列基因嚴格調(diào)控的生物學過程。自噬調(diào)控異常與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。自噬相關(guān)基因Beclin1和PTEN是調(diào)節(jié)自噬
3、體形成的關(guān)鍵基因,因此與腫瘤的關(guān)系非常密切。Beclin1通過ROS途徑促進自噬。研究表明Beclin1雜合性缺失是細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的原因之一,是一個候選的腫瘤抑制基因。PTEN是一種磷酸酶基因,是通過降低PI3K激酶的濃度,從而提高自噬的活性。PTEN是通過增加自噬活性發(fā)揮抑癌基因的作用。因此研究Beclin1和PTEN蛋白在食管鱗癌組織中的表達,從而為食管癌的診斷和治療提供分子生物學依據(jù),并為新藥的開發(fā)提供理論依據(jù)。
4、目的
檢測自噬相關(guān)基因Beclin1和PTEN在食管鱗癌中的蛋白表達情況,探討其與食管癌發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)性及意義。
材料與方法
66例食管癌標本和38例正常食管組織均來自鄭州大學第一附屬醫(yī)院病理科2008年存檔蠟塊。在66例食管癌標本中,男48例,女18例;年齡34~75(58.0±11.2)歲;全部標本經(jīng)病理證實為食管鱗狀細胞癌。高分化鱗癌34例,中低分化鱗癌32例;未浸潤到深肌層32例,浸潤
5、到深肌層及以上34例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移33例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移33例。術(shù)前均未行放化療。所有組織均經(jīng)10%福爾馬林固定、石蠟包埋、4μm連續(xù)切片,進行組織病理學檢查和免疫組織化學檢查。切片常規(guī)脫蠟水化后用體積分數(shù)3%的過氧化氫溶液去除內(nèi)源性過氧化氫酶,微波修復抗原,其余步驟按試劑盒說明書進行,抗體稀釋度均為1:100。用已知陽性切片作陽性對照,用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對照。采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析:x2檢驗進行組
6、間差異性比較,Spearman秩相關(guān)作相關(guān)性分析,檢驗水準α=0.05。
結(jié)果:
1 Beclin1蛋白及PTEN蛋白在食管鱗癌組織及正常食管上皮組織中的陽性染色定位于細胞胞漿。
2食管鱗癌組織中Beclin1蛋白表達率是48.5%(32/66),顯著低于正常對照組89.5%(34/38),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);Beclin1蛋白在高分化鱗癌組表達率是82.4%(28/34),顯著高
7、于中低分化鱗癌組12.5%(4/32),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);Beclin1蛋白的表達與食管癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性(P>0.05)。
3食管鱗癌組織中PTEN蛋白表達率是45.5%(30/66),顯著低于正常對照組94.7%(36/38),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);PTEN蛋白在高分化鱗癌表達率是76.5%(26/34),顯著高于中低分化鱗癌組12.5%(4/32),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.
8、05);PTEN蛋白在未浸潤深肌層組的表達率是68.7%《22/32),顯著高于浸潤深肌層外組23.5%(8/34),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);PTEN蛋白在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達率是66.7%(22/33),顯著高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組24.2%(8/33),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
4 Beclin1蛋白與PTEN蛋白在食管癌中的表達呈正相關(guān)(rs=0.754,P<0.05)。
結(jié)論:
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