自噬相關(guān)基因Beclin1和PTEN在食管鱗癌中的表達(dá)和意義.pdf

1、我國(guó)是食管癌相對(duì)高發(fā)的國(guó)家，同時(shí)也是食管癌死亡率最高的國(guó)家。食管癌已經(jīng)嚴(yán)重威脅到我國(guó)人民的健康。如何實(shí)施早期食管癌的診斷和晚期食管癌的化療是困擾臨床醫(yī)生的難題。對(duì)于食管癌發(fā)病機(jī)理的研究將為食管癌的早期診斷和治療提供理論依據(jù)。目前，利用分子生物學(xué)技術(shù)，從基因水平探索腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及治療是腫瘤研究的熱點(diǎn)。正常細(xì)胞處于增殖和死亡的平衡狀態(tài)，腫瘤細(xì)胞的一個(gè)顯著特性就是無(wú)限增殖。腫瘤和細(xì)胞死亡密切相關(guān)。因此研究腫瘤細(xì)胞的死亡就成為腫瘤研究

2、的熱點(diǎn)。自噬、凋亡、壞死是細(xì)胞死亡的三種形式。細(xì)胞凋亡是由Caspase(天冬氨酸特異性的半胱氨酸蛋白水解酶)介導(dǎo)的，以凋亡小體形成為特點(diǎn)的程序性細(xì)胞死亡，被稱為1型細(xì)胞死亡；自噬是非Caspase介導(dǎo)的，以自噬體形成為特點(diǎn)的程序性細(xì)胞死亡，被稱為Ⅱ型細(xì)胞死亡。最近研究表明自噬活性的改變與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。自噬是一系列基因嚴(yán)格調(diào)控的生物學(xué)過程。自噬調(diào)控異常與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。自噬相關(guān)基因Beclin1和PTEN是調(diào)節(jié)自噬

3、體形成的關(guān)鍵基因，因此與腫瘤的關(guān)系非常密切。Beclin1通過ROS途徑促進(jìn)自噬。研究表明Beclin1雜合性缺失是細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的原因之一，是一個(gè)候選的腫瘤抑制基因。PTEN是一種磷酸酶基因，是通過降低PI3K激酶的濃度，從而提高自噬的活性。PTEN是通過增加自噬活性發(fā)揮抑癌基因的作用。因此研究Beclin1和PTEN蛋白在食管鱗癌組織中的表達(dá)，從而為食管癌的診斷和治療提供分子生物學(xué)依據(jù)，并為新藥的開發(fā)提供理論依據(jù)。
　　

4、目的
　　 檢測(cè)自噬相關(guān)基因Beclin1和PTEN在食管鱗癌中的蛋白表達(dá)情況，探討其與食管癌發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)性及意義。
　　 材料與方法
　　 66例食管癌標(biāo)本和38例正常食管組織均來(lái)自鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2008年存檔蠟塊。在66例食管癌標(biāo)本中，男48例，女18例；年齡34～75(58.0±11.2)歲；全部標(biāo)本經(jīng)病理證實(shí)為食管鱗狀細(xì)胞癌。高分化鱗癌34例，中低分化鱗癌32例；未浸潤(rùn)到深肌層32例，浸潤(rùn)

5、到深肌層及以上34例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移33例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移33例。術(shù)前均未行放化療。所有組織均經(jīng)10％福爾馬林固定、石蠟包埋、4μm連續(xù)切片，進(jìn)行組織病理學(xué)檢查和免疫組織化學(xué)檢查。切片常規(guī)脫蠟水化后用體積分?jǐn)?shù)3％的過氧化氫溶液去除內(nèi)源性過氧化氫酶，微波修復(fù)抗原，其余步驟按試劑盒說明書進(jìn)行，抗體稀釋度均為1：100。用已知陽(yáng)性切片作陽(yáng)性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對(duì)照。采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：x2檢驗(yàn)進(jìn)行組

6、間差異性比較，Spearman秩相關(guān)作相關(guān)性分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1 Beclin1蛋白及PTEN蛋白在食管鱗癌組織及正常食管上皮組織中的陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞胞漿。
　　 2食管鱗癌組織中Beclin1蛋白表達(dá)率是48.5％(32/66)，顯著低于正常對(duì)照組89.5％(34/38)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Beclin1蛋白在高分化鱗癌組表達(dá)率是82.4％(28/34)，顯著高

7、于中低分化鱗癌組12.5％(4/32)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Beclin1蛋白的表達(dá)與食管癌的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 3食管鱗癌組織中PTEN蛋白表達(dá)率是45.5％(30/66)，顯著低于正常對(duì)照組94.7％(36/38)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);PTEN蛋白在高分化鱗癌表達(dá)率是76.5％(26/34)，顯著高于中低分化鱗癌組12.5％(4/32)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.

8、05);PTEN蛋白在未浸潤(rùn)深肌層組的表達(dá)率是68.7％《22/32)，顯著高于浸潤(rùn)深肌層外組23.5％(8/34)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);PTEN蛋白在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)率是66.7％(22/33)，顯著高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組24.2％(8/33)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4 Beclin1蛋白與PTEN蛋白在食管癌中的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.754，P＜0.05)。
　　 結(jié)論：