近江牡蠣（Ostrea rivularis）兩個野生種群遺傳多樣性的研究.pdf

1、近江牡蠣(Ostrearivularis)廣泛分布在我國南北沿海，多棲息在河口附近鹽度較低的內(nèi)灣，是我國主要的養(yǎng)殖貝類之一。作為經(jīng)濟貝類，通過對其分子遺傳學(xué)水平的研究可以讓人們更好的保護、利用和開發(fā)這種資源，創(chuàng)造更好的經(jīng)濟效益。廣東沿海對近江牡蠣的養(yǎng)殖有三百余年的悠久歷史，湛江官渡和陽江程村兩地的近江牡蠣是目前廣東沿海具有規(guī)模性開發(fā)和應(yīng)用價值的兩個天然種群，但是對它們在分子水平的研究卻很少。因此本實驗以此兩地的野生近江牡蠣為研究對象，以

2、隨機擴增多態(tài)性(RAPD)和rDNA-ITS1序列分析為實驗技術(shù)手段，結(jié)合形態(tài)學(xué)特征統(tǒng)計分析對這兩個地理種群進行遺傳多樣性分析，結(jié)果表明： (一)形態(tài)學(xué)特征分析： 為了評價種群間的差異，共測量了九個形態(tài)指標(biāo)：總重(TW)、右殼長(RAPM)、右殼高(RDVM)、右殼凸(RT)、韌帶長(HL)、左殼長(LAPM)、左殼高(LDVM)、左殼凸(LT)和閉殼肌痕寬(SW)。湛江種群的九個形態(tài)指標(biāo)平均值分別為23.68g、53.

3、05mm、79.80mm、20.50mm、18.74mm、55.43mm、82.06mm、20.75mm和15.27mm；陽江種群的九個形態(tài)指標(biāo)平均值分別為35.55g、60.58mm、97.62mm、23.53mm、19.80mm、66.11mm、103.19mm、32.40mm和17.90mm。 為了消除貝體規(guī)格大小對參數(shù)值的影響，將每只貝的所有參數(shù)分別除以左殼高(左殼高除外)予以校正，得出8個形態(tài)學(xué)比例性狀(X1～X8)進

4、行主成分分析。共構(gòu)建4個主成分，其貢獻率分別為34.8﹪、21.2﹪、15.3﹪和13.2﹪，累積貢獻率為84.5﹪。 (二)隨機擴增多態(tài)性(RAPD)分析： 選用12個擴增效果好、穩(wěn)定的引物進行擴增，共得到157個位點，平均每個引物可產(chǎn)生13個位點，片段長度在200～2200bp之間。分析結(jié)果顯示：湛江、陽江兩個種群的多態(tài)位點比例為89.62﹪和89.57﹪；遺傳多樣性指數(shù)為0.4170和0.4334；種群間平均遺傳距

5、離D為0.0327、平均遺傳相似性為0.9681以及平均遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.0437。 (三)rDNA-ITS1序列分析： 用合適的引物擴增了核糖體DNA轉(zhuǎn)錄間隔子Ⅰ區(qū)間的序列，得到18S、5.8S部分序列和ITS1全部序列(包含引物)，其中ITS1序列片段長度為478～485bp，共有11個變異位點，兩個為轉(zhuǎn)換(A/G)，其他為插入/缺失(A/-、T/-)。湛江和陽江種群各獲得8個基因型，其中兩種群共享一個基因