低氧誘導(dǎo)因子在過(guò)度訓(xùn)練致急性腎損傷中的表達(dá)及其對(duì)紅細(xì)胞生成素調(diào)控作用的研究.pdf

1、目的： 過(guò)度訓(xùn)練可引起機(jī)體的損傷，如何防治運(yùn)動(dòng)引起臟器損傷是目前運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)、軍事醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)關(guān)注的重大課題。本研究通過(guò)讓大鼠游泳至力竭，建立過(guò)度訓(xùn)練致急性腎損傷(overtraining induced acute kidney injury，OTLAKI)模型。研究大鼠力竭后不同時(shí)間腎臟病理、腎組織低氧誘導(dǎo)因子(hypoxia inducible factor-1α HIF-1α)、促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin

2、 EPO)表達(dá)及血清EPO濃度的變化及其相互關(guān)系，觀察了山莨菪堿對(duì)上述變化的影響，皆在加深對(duì)OTIAKI發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，為臨床OTIAKI的防治提供新的理論依據(jù)。 方法： 1.分組雄性Wistar大鼠36只，體重200-220g，隨機(jī)分為安靜對(duì)照組(CN組)；力竭運(yùn)動(dòng)后即刻組(ESI組)；力竭運(yùn)動(dòng)后6小時(shí)組(ES6h組)；力竭運(yùn)動(dòng)后24小時(shí)組(ES24h組)；力竭運(yùn)動(dòng)后6小時(shí)+山莨菪堿組(AD6h組)；力竭運(yùn)動(dòng)后24小

3、時(shí)+山莨菪堿組(AD24h組)。 2.采用大鼠游泳至力竭建立過(guò)度訓(xùn)練致大鼠急性腎損傷動(dòng)物模型。各實(shí)驗(yàn)組大鼠于實(shí)驗(yàn)前一天適應(yīng)性游泳30分鐘，第二天再次放于水中，游泳直到力竭。AD6h組、AD24h組大鼠在入水前10分鐘于腹腔注射山莨菪堿(10mg/kg)。 3.取材力竭后即刻組大鼠于發(fā)生力竭后立刻使用乙醚麻醉，麻醉理想后于腹部正中切開。先于門靜脈采血，注入抗凝管待測(cè)；后摘取雙腎，置入4℃4％多聚甲醛中固定。其余各實(shí)驗(yàn)組也于

4、相應(yīng)時(shí)間運(yùn)用同樣的方法取材。 4.制作病理切片，HE染色，光鏡下觀察各組大鼠腎病理改變。 5.應(yīng)用酶聯(lián)免疫(ELISA)及免疫組化法檢測(cè)大鼠力竭后不同時(shí)間腎組織低氧誘導(dǎo)因子及促紅細(xì)胞生成素的表達(dá)及血清EPO濃度。 結(jié)果： 1.力竭即刻組和6小時(shí)組大鼠腎組織在光鏡下有輕微缺血性改變，力竭后24小時(shí)可以觀察到部分腎小管上皮刷狀緣脫落，還可見浸潤(rùn)細(xì)胞。山莨菪堿組大鼠在力竭后6小時(shí)及24小時(shí)腎組織結(jié)構(gòu)在光鏡下均未

5、發(fā)現(xiàn)明顯異常。 2.正常大鼠腎組織HIF-1α表達(dá)很少，力竭后即刻組大鼠腎臟組織中HIF-1α與對(duì)照組比較明顯增高(P<0.01)；力竭后6小明繼續(xù)增高(P<0.01)；力竭后24小時(shí)腎臟組織中HIF-1α比力竭后6小時(shí)有所降低，但仍明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。與單純力竭組比較山莨菪堿6小時(shí)組大鼠腎臟組織中HIF-1α明顯增高(P<0.01)，山莨菪堿24小時(shí)組大鼠則無(wú)明顯改變(P>0.05)。 3.正常大鼠腎臟表達(dá)

6、EPO，力竭后即刻組大鼠腎臟組織中EPO與對(duì)照組比較明顯增高(P<0.05)；力竭后6小時(shí)繼續(xù)增高(P<0.01)；力竭后24小時(shí)腎臟組織中HIF-1α比力竭后6小時(shí)有所降低，但仍明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。與單純力竭組比較山莨菪堿6小時(shí)組大鼠。腎臟組織中EPO明顯增高(P<0.05)，山莨菪堿24小時(shí)組大鼠則無(wú)明顯改變(P>0.05)。 4.力竭后即刻組大鼠血清中EPO濃度與對(duì)照組比較明顯增高(P<0.01)，力竭后6小時(shí)

7、繼續(xù)增高，并達(dá)到最高峰(P<0.01)，力竭后24小時(shí)血清EPO濃度比力竭后6小時(shí)有所下降，但仍高于對(duì)照組(P<0.01)。力竭后山莨菪堿組大鼠血清中EPO的表達(dá)較對(duì)照組增加(P<0.01)。 結(jié)論： 1.力竭后即刻組大鼠腎組織HIF-1α及其下游基因EPO表達(dá)增強(qiáng)，血清中EPO濃度也增高，力竭后6小時(shí)達(dá)高峰，腎組織結(jié)構(gòu)變化輕微，這可能是過(guò)度訓(xùn)練大鼠腎臟代償性保護(hù)的重要機(jī)制。力竭后24小時(shí)大鼠腎組織HIF-1α及EPO表

8、達(dá)比力竭后6小時(shí)組均有不同程度下降，血漿。EPO濃度也下降，此時(shí)腎組織結(jié)構(gòu)有明顯損傷，提示力竭后24小時(shí)大鼠腎臟自身代償性保護(hù)機(jī)制逐漸減弱，進(jìn)而引起急性腎損傷。 2.應(yīng)用山莨菪堿后大鼠腎組織HIF-1α及其下游基因EPO表達(dá)增強(qiáng)，血清中EPO濃度也增高，腎組織結(jié)構(gòu)未發(fā)現(xiàn)明顯改變。提示山莨菪堿可通過(guò)提高腎組織HIF-1α及其下游基因EPO的表達(dá)以及血清EPO的濃度，進(jìn)而對(duì)過(guò)度訓(xùn)練大鼠起到腎臟保護(hù)作用，這可能是山莨菪堿防治過(guò)度訓(xùn)練致