高原環(huán)境對(duì)睡眠剝奪大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、第一部分高原環(huán)境對(duì)睡眠剝奪大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
　　 目的：探討高原環(huán)境對(duì)睡眠剝奪(SD)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
　　 方法：采用小平臺(tái)水環(huán)境法(flowerpot)建立大鼠SD模型。選用wistar大鼠64只，根據(jù)SD時(shí)間的不同(0～5 d)，隨機(jī)分為4組，每組又分為可可西里組(K，海拔4767 m)和蘭州組(L，海拔1500 m)，可可西里組大鼠由蘭州用汽車2天內(nèi)運(yùn)至可可西里。在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)各組大鼠行Morris

2、水迷宮測(cè)試，觀察并記錄動(dòng)物找到并爬上平臺(tái)的潛伏期、游泳路程及游泳軌跡，SPT測(cè)試中記錄大鼠120 s內(nèi)穿越原平臺(tái)平面的次數(shù)。
　　 結(jié)果：1 d、3 d和5 d的潛伏期，K分別為31.38±5.33 s、40.59±4.46 s、49.69±7.93s，L分別為24.18±5.17 s、34.19±4.72 s、41.43±6.78 s，K高于L；1 d、3 d和5 d的游泳路程，K分別為6.67±0.59 m、8.73±0.8

3、1 m、10.20±0.82 m，L分別為5.88±0.61 m、7.62±0.83 m、8.91士0.52 m，K高于L，5 d差別最明顯；1 d、3 d和5 d的穿越平臺(tái)次數(shù)，K分別為3.88±0.99、3.75士1.04、3.63±1.06，L分別為5.63±1.06、5.50±1.20、5.38±1.06，K小于L。
　　 結(jié)論：睡眠剝奪使大鼠學(xué)習(xí)記憶能力降低，高原環(huán)境暴露可使睡眠剝奪大鼠學(xué)習(xí)記憶能力進(jìn)一步降低。

4、　　 第二部分高原環(huán)境暴露下睡眠剝奪大鼠海馬5-HT、BDNF的表達(dá)規(guī)律及超微結(jié)構(gòu)的改變
　　 目的：觀察高原環(huán)境暴露下睡眠剝奪大鼠海馬5-HT、BDNF的表達(dá)規(guī)律，并用光鏡及電鏡觀察海馬形態(tài)學(xué)變化。
　　 方法：采用小平臺(tái)水環(huán)境法建立大鼠SD模型。選用wistar大鼠80只，根據(jù)SD時(shí)間的不同(c～5 d)，隨機(jī)分為4組，每組又分為可可西里組(K，海拔4767 m)和蘭州組(L，海拔1500 m)，可可西里組大鼠由蘭

5、州用汽車2天內(nèi)運(yùn)至可可西里。用免疫組化法檢測(cè)大鼠海馬組織中5-HT、BDNF的含量，用電鏡觀察海馬超微結(jié)構(gòu)的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1、對(duì)照組(c)、1d、3d和5d組的海馬5-HT平均光密度值，K分別為0.23±0.03、0.27±0.04、0.31±0.02、0.35±0.02，L分別為0.20±0.02、0.22±0.02、0.25±0.02、0.29±0.02。0d、1d組的5-HT含量，K高于L，3 d、5

6、 d組的5-HT含量，K高于L；K、L組組內(nèi)比較，SD后海馬5-HT含量增高。
　　 2、c、1 d、3 d和5 d組的海馬BDNF陽性細(xì)胞數(shù)，K分別為42.75±6.04、68.25±7.32、107.47±9.33、110.27±8.94，L分別為36.37±4.44、51.63±6.21、76.49±6.37、73.36±7.38。0d、1d組的5-HT含量，K高于L，3d、5d組的5-HT含量，K高于L；K、L組組內(nèi)比較

7、，SD后海馬5-HT含量增高。
　　 3、與L相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)組相比，光鏡下可見K神經(jīng)元數(shù)目減少，排列紊亂，細(xì)胞輪廓模糊，出現(xiàn)大量空泡。電鏡下可見CA1區(qū)神經(jīng)元胞體明顯水腫，核膜消失，胞核縮小，細(xì)胞器減少，微血管周圍膠質(zhì)足腫脹、破裂，典型的突觸結(jié)構(gòu)消失。
　　 結(jié)論：睡眠剝奪及高原環(huán)境暴露可使海馬5-HT、BDNF的表達(dá)增高，睡眠剝奪及高原環(huán)境暴露下大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的下降可能與海馬中5-HT、BDNF的表達(dá)變化及海馬CA1區(qū)超

8、微結(jié)構(gòu)的改變有關(guān)。
　　 第三部分人參皂甙Rd對(duì)高原環(huán)境暴露下睡眠剝奪大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
　　 目的：探討人參皂甙Rd對(duì)高原環(huán)境暴露下睡眠剝奪大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬BDNF表達(dá)的影響。
　　 方法：用小平臺(tái)水環(huán)境法建立SD模型。選用wistar大鼠64只，由蘭州(海拔1500 m)用汽車2天內(nèi)運(yùn)至可可西里(海拔4767 m)。根據(jù)SD時(shí)間的不同(0～5d)，隨機(jī)分為4組，每組又分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組給予人

9、參皂甙Rd，對(duì)照組給予等量生理鹽水。相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)各組大鼠行Morris水迷宮測(cè)試，觀察并記錄動(dòng)物找到并爬上平臺(tái)的潛伏期、游泳路程及游泳軌跡，SPT測(cè)試中記錄大鼠120 s內(nèi)穿越原平臺(tái)平面的次數(shù)。用免疫組化法檢測(cè)大鼠海馬組織中BDNF的含量。
　　 結(jié)果：
　　 1、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)：1、3、5 d組的潛伏期，實(shí)驗(yàn)組分別為25.16±4.61s、32.18±4.46s、43.73±6.93 s，對(duì)照組分別為30.28

10、±4.17 s、41.13±5.63 s、50.02±5.87 s，1、5 d組潛伏期，實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組，3 d組潛伏期，實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組；1、3、5 d組的游泳距離，實(shí)驗(yàn)組分別為5.66士0.68 m、7.28±0.75 m、8.89士0.95，對(duì)照組分別為6.53±0.63 m、8.53士0.81 m、9.96士1.02 m，1、5 d組游泳距離，實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組，3 d組游泳距離，實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組；SD各時(shí)間點(diǎn)組穿越平臺(tái)次數(shù)，實(shí)驗(yàn)

11、組和對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 2、海馬BDNF含量：1、3、5 d組海馬BDNF陽性細(xì)胞數(shù)，實(shí)驗(yàn)組分別為79.51±6.58、131.52±7.18、152.61±9.22，對(duì)照組分別為68.25±7.32、107.47±9.33、110.27±8.94，1 d組BDNF含量，實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組，3、5 d組BDNF含量，實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組。
　　 結(jié)論：人參皂甙Rd對(duì)高原環(huán)境下睡眠剝奪大鼠學(xué)習(xí)記憶的損害有保護(hù)作用，這種作

12、用可能與促進(jìn)海馬BDNF表達(dá)有關(guān)。
　　 第四部分丹紅注射液對(duì)睡眠剝奪大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
　　 目的：探討丹紅注射液(Danhong injection)對(duì)睡眠剝奪(SD)大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)的影響。
　　 方法：用小平臺(tái)水環(huán)境法建立SD模型。選用wistar大鼠72只，根據(jù)SD時(shí)間的不同(0～5d)，隨機(jī)分為6組，每組又分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組給予丹紅注射液，對(duì)照組給予等量生

13、理鹽水。相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)各組大鼠行Morris水迷宮測(cè)試，觀察并記錄動(dòng)物找到并爬上平臺(tái)的潛伏期、游泳路程及游泳軌跡，SPT測(cè)試中記錄大鼠120 s內(nèi)穿越原平臺(tái)平面的次數(shù)。用免疫組化法檢測(cè)大鼠海馬組織中GFAP的含量。
　　 結(jié)果：
　　 1、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)：2、3、4、5 d組的潛伏期，實(shí)驗(yàn)組分別為20.41±2.14 s、21.89±1.00 s、26.35±1.86 s、34.21±3.28 s，對(duì)照組分別為23

14、.77±2.25 s、27.96±2.81s、33.73±3.77 s、40.11±3.30 s，2、3、5 d組潛伏期，實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組，4d組潛伏期，實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組；2、3、4、5 d組的游泳距離，實(shí)驗(yàn)組分別為5.07±0.28 m、5.82±0.28 m、6.61±0.44 m、8.47±0.74 m，對(duì)照組分別為5.60±0.43 m、6.57±0.50 m、7.70±0.64 m、9.44±0.57 m，2、5 d組游泳路程

15、，實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組，3、4 d組游泳路程，實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組；SD各時(shí)間點(diǎn)組穿越平臺(tái)次數(shù)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 2、海馬GFAP含量：2、3、4、5 d組海馬GFAP含量，實(shí)驗(yàn)組分別為0.25±0.03、0.29士0.04、0.34±0.03、0.38±0.03，對(duì)照組分別為0.21±0.03、0.24±0.03、0.27±0.03、0.31±0.03，2、3 d組GFAP含量，實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組，4、5 d組GFAP