SD大鼠損傷下頜下腺的組織學(xué)觀察.pdf

1、[目的]通過(guò)結(jié)扎SD大鼠下頜下腺主導(dǎo)管，建立組織損傷模型；觀察導(dǎo)管結(jié)扎后損傷及導(dǎo)管再通后腺體的組織學(xué)變化。 [方法]選用10周齡Sprague-Dawlye（SD）雄性大鼠30只。導(dǎo)管結(jié)扎組20只，導(dǎo)管結(jié)扎后松開再通組10只。導(dǎo)管結(jié)扎組：大鼠麻醉后隨機(jī)行一側(cè)下頜下腺主導(dǎo)管魚線捆綁結(jié)扎，于結(jié)扎后第3天、6天…27天、30天處死動(dòng)物，取出結(jié)扎及對(duì)側(cè)正常對(duì)照的下頜下腺。導(dǎo)管結(jié)扎后松開再通組：主導(dǎo)管結(jié)扎6天，然后松開結(jié)扎使主導(dǎo)管再通，分

2、別于松開再通后第4天、5天、6天、12天、24天處死動(dòng)物，取出實(shí)驗(yàn)側(cè)及對(duì)照側(cè)下頜下腺組織。以上腺體于10％福爾馬林（pH7.2～7.4）溶液中固定，常規(guī)HE染色，AB-PAS糖原染色和Cytokeratin19，α-SMA， Laminin，AQP-5的免疫組織化學(xué)染色。 [結(jié)果]1.形態(tài)學(xué)觀察，導(dǎo)管結(jié)扎組：與對(duì)側(cè)正常腺體相比，腺體體積逐漸減??；由卵圓形變成長(zhǎng)梭形，色澤由紅潤(rùn)轉(zhuǎn)變成暗紅，包膜表面血管增多呈充血狀，質(zhì)地變韌，周圍組

3、織血管代償性擴(kuò)張。導(dǎo)管結(jié)扎后松開再通組：所有腺體基本維持在結(jié)扎6天后的大小，腺體稍紅潤(rùn)，周圍血管充血在導(dǎo)管再通后逐漸消退。2.組織學(xué)觀察，HE、AB-PAS及免疫組織化學(xué)染色：正常腺體：可見大量成熟腺泡，偶可見顆粒導(dǎo)管。導(dǎo)管結(jié)扎組：腺泡逐步萎縮、消失，然后形成導(dǎo)管結(jié)構(gòu)，均表達(dá)CK19；在導(dǎo)管基底膜區(qū)，有一層表達(dá)LN和α-SMA陽(yáng)性的細(xì)胞存在，但不表達(dá)CK19，在第12天時(shí)最明顯，從第15天后開始減少。導(dǎo)管結(jié)扎后松開再通組：導(dǎo)管再通后，導(dǎo)

4、管細(xì)胞向腺泡細(xì)胞逐漸轉(zhuǎn)化；在松開后第5天，AQP5表達(dá)增強(qiáng)，有成熟的腺泡出現(xiàn)，到第24天，有大量成熟腺泡形成；部分導(dǎo)管細(xì)胞向成熟腺泡細(xì)胞轉(zhuǎn)化，同時(shí)在導(dǎo)管基底膜區(qū)LN和α-SMA陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞逐漸減少。 [結(jié)論]1.主導(dǎo)管結(jié)扎后，腺體體積減小，腺泡細(xì)胞逐步消失，腺體失去分泌功能。結(jié)扎的導(dǎo)管再通后，導(dǎo)管細(xì)胞可向成熟的腺泡細(xì)胞轉(zhuǎn)化。2.由以上觀察，我們初步得到以下結(jié)論：在一定時(shí)間內(nèi)，導(dǎo)管結(jié)扎腺體的損傷可能會(huì)激發(fā)成體干細(xì)胞增殖；導(dǎo)管松開