TiO-,2-納米薄膜影響細(xì)胞黏附生長的體外研究.pdf

1、目的：通過觀察經(jīng)長波紫外線UVA(365nm)直接照射或預(yù)照射兩種激發(fā)處理后，TiO<,2>納米薄膜對體外培養(yǎng)的牛晶體上皮細(xì)胞和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的抑制效應(yīng)：研究該薄膜影響表面細(xì)胞黏附生長的特性。 方法：在玻片上涂覆TiO<,2>納米薄膜，并以未鍍膜玻片為對照。實驗分為兩部分，第一部分將兩種玻片在不同強度(0.102mw/cm<'2>和0.825mw/cm<'2>)的UVA下照射不同時間(0、10、20、30、40min)，觀察玻

2、片表面的晶體上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞生長的數(shù)量和狀態(tài)；第二部分則將兩種玻片先經(jīng)UVA(0.825mw/cm<'2>)預(yù)照射不同時間(0、20、40、60、80min)后停止光照，觀察各玻片表面的接觸角以及晶體上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在其表面黏附的數(shù)量和形態(tài)。兩部分實驗均用MTT比色法評估晶體上皮細(xì)胞量，并以AO-EB染色法觀察其形態(tài)；同時用瑞氏染色后計數(shù)法測定巨噬細(xì)胞量，并以掃描電鏡觀察其形態(tài)。 結(jié)果: 第一部分實驗發(fā)現(xiàn)，鍍TiO<

3、,2>納米薄膜玻片在0.102mw/cm<'2>的UVA激發(fā)40分鐘或0.825mw/cm<'2>的UVA激發(fā)30分鐘時，表面存活的細(xì)胞量比未鍍膜玻片顯著減少(P<0.01)，且晶體上皮細(xì)胞出現(xiàn)AO-EB染色的凋亡和壞死特征，巨噬細(xì)胞出現(xiàn)質(zhì)膜破裂、細(xì)胞崩解的掃描電鏡表現(xiàn)。激發(fā)時間越長，TiO<,2>納米薄膜上的細(xì)胞量越少，且0.825mw/cm<'2>的光源較0.102mw/cm<'2>的光源更能激發(fā)TiO<,2>的殺傷作用。

4、第二部分實驗發(fā)現(xiàn)，鍍TiO<,2>納米薄膜玻片較對照玻片有較小的接觸角，當(dāng)其經(jīng)UVA預(yù)照射達(dá)80分鐘時，接觸角接近0<'。> (1.78±0.47<'。>)。經(jīng)預(yù)照射20分鐘后，TiO<,2>納米薄膜表面的晶體上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞黏附量較對照組顯著降低。預(yù)照射處理時間越長，鍍膜玻片表面的黏附細(xì)胞越少，且呈現(xiàn)失活狀態(tài)。掃描電鏡示預(yù)照射80分鐘后，TiO<,2>納米薄膜表面黏附的晶體上皮細(xì)胞收縮成橢圓形，巨噬細(xì)胞絲狀偽足消失。而對照玻片經(jīng)預(yù)照

5、射后，黏附細(xì)胞仍表現(xiàn)功能活躍的形態(tài)。 結(jié)論：(1)TiO<,2>納米薄膜在UVA的激發(fā)照射一定時間后，能發(fā)生光催化氧化反應(yīng)，使其表面的晶體上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死。(2)TiO<,2>納米薄膜的光催化細(xì)胞殺傷效應(yīng)必須以UVA的激發(fā)照射為前提，且與光源的強度呈正性量效關(guān)系，而與照射時間呈時效關(guān)系。(3)TiO<,2>納米薄膜在UVA預(yù)照射處理后，表現(xiàn)出光生超親水性，且親水性在停止光照后仍能保持一定的時間。(4)TiO<,2