經(jīng)動脈持續(xù)灌注β-欖香烯治療兔VX2肝移植癌的研究.pdf

1、目的： 本次實驗擬觀察經(jīng)肝動脈持續(xù)灌注β-欖香烯乳劑對兔VX2肝臟移植癌的干預(yù)效應(yīng)，研究β-欖香烯乳劑經(jīng)動脈持續(xù)灌注后在兔體內(nèi)的藥物代謝動力學及其體內(nèi)過程；并觀察β-欖香烯乳劑持續(xù)灌注治療兔VX2肝臟移植癌的病理情況及對bax、bcl-2(bcl-2是細胞凋亡調(diào)控蛋白，阻斷細胞凋亡，延長細胞存活時間，bax是細胞凋亡調(diào)節(jié)基因，拮抗bcl-2的作用)表達的影響，從而進一步探討β-欖香烯抗腫瘤機制，為其更好的應(yīng)用于臨床尋找理論依據(jù)。

2、 方法： 42只日本大耳白兔成功建立肝VX2肝臟腫瘤模型。隨機分為對照組：(A組)：6只，5小時勻速注入50mg空白乳；治療組(B組)：30只，5小時勻速注入50mgβ-欖香烯，其中24只留做藥物代謝動力學，6只與A、C組一起行病理及免疫組化：C組：6只，5小時勻速注入5-FU(5-氟尿嘧啶)50mg。經(jīng)股動脈插管，導管頭端置于兔肝固有動脈，按不同分組給予相應(yīng)的藥物進行灌注治療。B組介入治療后24只分別取動脈血，靜脈血及

3、腫瘤(制成瘤漿)，測其中的藥物濃度。B組其余實驗兔及A、C組實驗兔在介入治療后2周處死，取全部腫瘤組織，在光鏡下觀察腫瘤組織的病理變化，免疫組化檢測bax及bcl-2，評價不同方案的治療效果。 結(jié)果： 1.大體標本： (1)3組標本大體觀察腫瘤瘤重差別較大，空白乳組瘤重最大，欖香烯持續(xù)灌注組和5-Fu組瘤重差別不大。 (2)不同程度的壞死：治療組標本表面觀呈均質(zhì)魚肉狀，切面觀腫瘤中央?yún)^(qū)呈不同程度的壞死，表

4、現(xiàn)為灰黃色豆腐渣樣改變，伴有少量出血，鄰近肝組織腫脹、被膜緊張；空白乳組標本出血較多，壞死較輕，表現(xiàn)為小片壞死區(qū)與存活腫瘤組織間隔存在，直至腫瘤邊緣，鄰近肝組織無明顯改變。 2.光鏡下：治療組腫瘤呈凝固性壞死，表現(xiàn)為一片細顆粒狀無結(jié)構(gòu)樣物質(zhì)，壞死組織徹底崩解。瘤旁肝組織可見明顯的水樣變性。表現(xiàn)為肝細胞明顯腫大，胞漿疏松、半透明，但細胞形態(tài)仍為多角形：腫瘤及周圍匯管區(qū)血管內(nèi)膜增厚合并血栓形成。所有治療組標本均見到有炎性細胞浸潤。其

5、中5-FU組呈中度壞死，欖香烯乳劑灌注組呈重度壞死。 3免疫組化：欖香烯持續(xù)灌注組腫瘤細胞中bcl-2的表達明顯減少，而bax的表達大大增加．β-欖香烯組與對照組凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax蛋白表達主要定位于癌細胞胞漿和部分間質(zhì)組織內(nèi)，少數(shù)可見胞漿和胞膜同時著色，呈灶狀或片狀分布，正常肝組織有少量表達。bcl-2表達的陽性率β-欖香烯組為10.09±1.23％，5-FU組為30.25±4.29％，而空白乳組為51.58±12.

6、40％，兩兩比較差異均具有顯著性(P<0.05)；bax的表達率β-欖香烯組與5-FU組及空白乳組分別為75.29±17.16％和41.90±9.39％及18.68±6.44％，兩兩比較差異均具有顯著性(P<0.05)。β-欖香烯組與5-FU組及空白乳組的bcl-2/bax比值分別為0.15、0.73、2.85，兩兩比較差異均具有顯著性(P<0.05)。 4藥物代謝動力學：動脈灌注后動脈血即取組濃度高于灌注后2小時后取組，二者比