經(jīng)動(dòng)脈持續(xù)灌注β-欖香烯治療兔VX2肝移植癌的研究.pdf

1、目的： 本次實(shí)驗(yàn)擬觀察經(jīng)肝動(dòng)脈持續(xù)灌注β-欖香烯乳劑對(duì)兔VX2肝臟移植癌的干預(yù)效應(yīng)，研究β-欖香烯乳劑經(jīng)動(dòng)脈持續(xù)灌注后在兔體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)及其體內(nèi)過(guò)程；并觀察β-欖香烯乳劑持續(xù)灌注治療兔VX2肝臟移植癌的病理情況及對(duì)bax、bcl-2(bcl-2是細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白，阻斷細(xì)胞凋亡，延長(zhǎng)細(xì)胞存活時(shí)間，bax是細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)基因，拮抗bcl-2的作用)表達(dá)的影響，從而進(jìn)一步探討β-欖香烯抗腫瘤機(jī)制，為其更好的應(yīng)用于臨床尋找理論依據(jù)。

2、 方法： 42只日本大耳白兔成功建立肝VX2肝臟腫瘤模型。隨機(jī)分為對(duì)照組：(A組)：6只，5小時(shí)勻速注入50mg空白乳；治療組(B組)：30只，5小時(shí)勻速注入50mgβ-欖香烯，其中24只留做藥物代謝動(dòng)力學(xué)，6只與A、C組一起行病理及免疫組化：C組：6只，5小時(shí)勻速注入5-FU(5-氟尿嘧啶)50mg。經(jīng)股動(dòng)脈插管，導(dǎo)管頭端置于兔肝固有動(dòng)脈，按不同分組給予相應(yīng)的藥物進(jìn)行灌注治療。B組介入治療后24只分別取動(dòng)脈血，靜脈血及

3、腫瘤(制成瘤漿)，測(cè)其中的藥物濃度。B組其余實(shí)驗(yàn)兔及A、C組實(shí)驗(yàn)兔在介入治療后2周處死，取全部腫瘤組織，在光鏡下觀察腫瘤組織的病理變化，免疫組化檢測(cè)bax及bcl-2，評(píng)價(jià)不同方案的治療效果。 結(jié)果： 1.大體標(biāo)本： (1)3組標(biāo)本大體觀察腫瘤瘤重差別較大，空白乳組瘤重最大，欖香烯持續(xù)灌注組和5-Fu組瘤重差別不大。 (2)不同程度的壞死：治療組標(biāo)本表面觀呈均質(zhì)魚(yú)肉狀，切面觀腫瘤中央?yún)^(qū)呈不同程度的壞死，表

4、現(xiàn)為灰黃色豆腐渣樣改變，伴有少量出血，鄰近肝組織腫脹、被膜緊張；空白乳組標(biāo)本出血較多，壞死較輕，表現(xiàn)為小片壞死區(qū)與存活腫瘤組織間隔存在，直至腫瘤邊緣，鄰近肝組織無(wú)明顯改變。 2.光鏡下：治療組腫瘤呈凝固性壞死，表現(xiàn)為一片細(xì)顆粒狀無(wú)結(jié)構(gòu)樣物質(zhì)，壞死組織徹底崩解。瘤旁肝組織可見(jiàn)明顯的水樣變性。表現(xiàn)為肝細(xì)胞明顯腫大，胞漿疏松、半透明，但細(xì)胞形態(tài)仍為多角形：腫瘤及周?chē)鷧R管區(qū)血管內(nèi)膜增厚合并血栓形成。所有治療組標(biāo)本均見(jiàn)到有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。其

5、中5-FU組呈中度壞死，欖香烯乳劑灌注組呈重度壞死。 3免疫組化：欖香烯持續(xù)灌注組腫瘤細(xì)胞中bcl-2的表達(dá)明顯減少，而bax的表達(dá)大大增加．β-欖香烯組與對(duì)照組凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax蛋白表達(dá)主要定位于癌細(xì)胞胞漿和部分間質(zhì)組織內(nèi)，少數(shù)可見(jiàn)胞漿和胞膜同時(shí)著色，呈灶狀或片狀分布，正常肝組織有少量表達(dá)。bcl-2表達(dá)的陽(yáng)性率β-欖香烯組為10.09±1.23％，5-FU組為30.25±4.29％，而空白乳組為51.58±12.

6、40％，兩兩比較差異均具有顯著性(P<0.05)；bax的表達(dá)率β-欖香烯組與5-FU組及空白乳組分別為75.29±17.16％和41.90±9.39％及18.68±6.44％，兩兩比較差異均具有顯著性(P<0.05)。β-欖香烯組與5-FU組及空白乳組的bcl-2/bax比值分別為0.15、0.73、2.85，兩兩比較差異均具有顯著性(P<0.05)。 4藥物代謝動(dòng)力學(xué)：動(dòng)脈灌注后動(dòng)脈血即取組濃度高于灌注后2小時(shí)后取組，二者比