基于適體的癌細胞檢測及碳納米管復合材料生物相容性研究.pdf

1、準確、靈敏地診斷白血病對于臨床醫(yī)生選擇合適的治療方法至關重要。目前白血病診斷的常規(guī)技術往往耗時、成本高、檢測儀器昂貴,所以,開發(fā)一些檢測成本低,使用儀器簡單,并能提供靈敏、準確的診斷結果的方法是即時診斷領域的發(fā)展目標。適體是一種被視為化學合成抗體的單鏈DNA/RNA構成的分子探針,在生物醫(yī)學領域具有廣闊的應用潛力。本論文在基于適體的腫瘤細胞檢測方面開展了一些研究工作。另外,構建納米復合材料用于發(fā)展骨組織工程意義重大。本論文的主要研究工作

2、如下:
　　 1.將對人急性白血病細胞(CCRF-CEM)具有特異性識別能力的巰基修飾適體(sgc8c)自組裝到金電極表面,開發(fā)了一種簡單、方便、低成本、無標記的早期檢測白血病細胞的電化學傳感器。用循環(huán)伏安和電化學阻抗表征了修飾電極,并通過計時庫侖分析得到了電極表面的適體密度。所制備的適體傳感器經(jīng)CCRF-CEM細胞孵育后,電極界面上的電子轉移電阻(Ret)顯著增大；且傳感器對CCRF—CEM細胞具有良好的選擇性。Ret值和細胞

3、濃度對數(shù)值呈線性關系,檢測線性范圍為1×104—1×107cells/mL,檢測限為6×103cells/mL。
　　 2.利用無標記金納米顆粒(AuNPs)做指示劑,開發(fā)了一種可視比色檢測腫瘤細胞的方法。該分析主要是基于單鏈DNA能夠展開并暴露出堿基部分,吸附到AuNPs表面,從而使得AuNPs在高鹽濃度下保持穩(wěn)定。當將CCRF-CEM細胞懸浮液和單鏈寡核苷酸適體sgc8c孵育后,適體可選擇性地結合到目標細胞表面,使得離心上清

4、液中DNA的濃度降低,導致AuNPs在高鹽濃度下失去穩(wěn)定并發(fā)生團聚,而非目標細胞RAJI和隨機序列DNA不會引起AuNPs溶液顏色的變化。該方法在肉眼比色分析和光譜分析方面都具有很好的靈敏度。
　　 3.通過溶劑揮發(fā)法,將碳納米管(CNTs)摻雜到殼聚糖-明膠(chitosan—gelatin,CG)復合材料中,顯著增強了CG復合材料的機械性能,將擴大其在骨組織工程中的應用前景。用掃描電鏡、接觸角測試和拉伸測試表征了CG/CNT