腹部手術(shù)后小腸動力障礙機制及抗炎靈調(diào)理作用的研究.pdf

1、論文一：抗炎靈對腹部手術(shù)后小腸動力障礙調(diào)理作用的研究.目的:探討腹部手術(shù)對小腸運動功能的影響及中藥抗炎靈的調(diào)理作用.方法:SD大鼠70只,隨機分出10只作為對照組,其余用于實驗組.將實驗組隨機分為手術(shù)組和抗炎靈組,每組30只,手術(shù)組接受腹部手術(shù),抗炎靈組則在手術(shù)前以抗炎靈煎劑灌胃.熒光標記法測定手術(shù)組、抗炎靈組和對照組大鼠小腸傳輸功能;以多導生理儀測定乙酰膽堿(Ach)刺激后小腸環(huán)行肌條的收縮能力;酶消化法制備游離環(huán)行平滑肌細胞,測定不

2、同濃度乙酰膽堿作用后各組小腸平滑肌細胞的收縮反應(yīng)和[Ca<'2+>]<,i>的變化.結(jié)論:腹部手術(shù)通過抑制小腸環(huán)行平滑肌細胞[Ca<'2+>]<,i>水平的升高,降低了平滑肌細胞的收縮反應(yīng),使小腸運動功能明顯下降.而術(shù)前應(yīng)用抗炎靈則可明顯提高平滑肌細胞[Ca<'2+>]<,i>的水平和/或鈣敏感性,提高平滑肌細胞收縮反應(yīng)能力,從而減輕了手術(shù)后小腸運動功能障礙的程度.論文二:抗炎靈對腹部手術(shù)后小腸肌層炎癥反應(yīng)抑制作用的研究.目的:通過對腹

3、部手術(shù)后小腸肌層炎癥反應(yīng)和抗炎靈的抑制作用的研究,進一步探討抗炎靈預防手術(shù)后胃腸動力障礙的作用機制.方法:參照實驗一制作動物模型.取手術(shù)組和抗炎靈組術(shù)后0h、3h、6h、12h、24h及對照組大鼠小腸標本,RT-PCR法檢測小腸肌層ICAM-1、P-selectin和iNOS的mRNA的表達量,應(yīng)用免疫組化法檢測并定位ICAM-1、P-selectin、LFA-1和iNOS蛋白表達.組織化學法評估小腸肌層白細胞浸潤程度,并測定小腸肌層組

4、織培養(yǎng)液NO的含量.結(jié)論:手術(shù)操作誘發(fā)了小腸肌層炎癥反應(yīng),并刺激小腸平滑肌細胞表達iNOS,過度產(chǎn)生NO,抑制小腸環(huán)行平滑肌的收縮功能.而術(shù)前應(yīng)用抗炎靈通過減輕小腸肌層炎癥反應(yīng),降低小腸肌層NO的含量,從而起到預防手術(shù)后腸梗阻的作用.實驗三：腹部手術(shù)后小腸動力障礙的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導機制及番瀉甙的調(diào)理作用.目的:探討腹部手術(shù)操作導致術(shù)后小腸運動功能障礙的分子機制和細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導途徑,并探討大黃的主要有效成分番瀉甙對小腸平滑肌細胞收縮的作用.

5、方法:SD大鼠10只,隨機分為實驗組和對照組(n=5),實驗組制作腹部手術(shù)動物模型,術(shù)后24小時取小腸標本,對照組不予麻醉和手術(shù).檢測實驗組和對照組在Ach作用下小腸環(huán)行肌條收縮、游離環(huán)行平滑肌細胞收縮反應(yīng)和細胞內(nèi)[Ca<'2+>]<,i>的變化,然后將標本分別與NO合成抑制劑LNNA、鈣活化的K<'+>通道阻滯劑Apamin、GC抑制劑ODQ、PKA抑制劑H89和PKG抑制劑KT5823等孵育,再重復以上實驗,確定手術(shù)操作影響平滑肌收

6、縮的分子機制和細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導途徑.檢測不同濃度的番瀉甙對小腸環(huán)行肌條和游離環(huán)行平滑肌細胞的收縮作用及對[Ca<'2+>]<,i>的影響,然后測定番瀉甙對Ach刺激的小腸環(huán)行肌條、游離環(huán)行平滑肌細胞收縮反應(yīng)和細胞內(nèi)[Ca<'2+>]<,i>變化的影響作用,并通過免疫熒光實驗檢測番瀉甙對RhoA的活化和空間轉(zhuǎn)位的影響.結(jié)論:腹部手術(shù)操作導致的小腸肌層大量生成NO,激活GC,產(chǎn)生cGMP,然后通過PKG途徑,降低細胞內(nèi)[Ca<'2+>]<,i