應(yīng)用重組干擾素γ阻斷GATA-3表達(dá)治療支氣管哮喘的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的 研究重組IFNγ(腹腔注射和霧化吸入)對(duì)支氣管哮喘(哮喘)小鼠氣道炎癥、Ⅱ型T輔助淋巴細(xì)胞(Th2)、血漿中總IgE、OVA特異性IgE及對(duì)轉(zhuǎn)錄因子GATA-3表達(dá)的影響，探討應(yīng)用重組IFNγ治療支氣管哮喘的可行性及作用機(jī)制。 方法 BALB/C小鼠隨機(jī)分為四組，正常對(duì)照組(A組，12只)、哮喘模型組(B組，12只)、IFNγ腹腔注射組(C組，12只)、IFNγ霧化吸入組(D組，12只)。B組、C組和D組采

2、用卵蛋白(OVA)氫氧化鋁建立哮喘模型，同時(shí)B組于第23d至第30d激發(fā)前1次/d給予腹腔注射0.25mlPBS液，C組于第23d至第30d激發(fā)前1次/d給予腹腔注射IFNγ5μg，D組于第23d至第30d激發(fā)前1次/d霧化吸入IFNγ12μg(每次霧化5只小鼠)。第31d收取支氣管肺泡灌洗液(BALF)測(cè)定細(xì)胞成份、IL-4、IL-5濃度；取心臟血測(cè)定血漿中總IgE及OVA特異性IgE水平；用HE染色切片觀察小鼠氣管、肺組織病理變化；

3、用免疫組化法測(cè)定肺組織中GATA-3的表達(dá)。 結(jié)果 (1)哮喘組BALF中嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)數(shù)量明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，而腹腔注射IFNγ組和霧化吸入IFNγ組BALF中的EOS則明顯低于哮喘組(P＜0.01)； (2)哮喘組BALF中IL-4、IL-5的水平明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，而給予腹腔注射IFNγ和霧化吸入IFNγ處理的哮喘鼠BALF中的IL-4和IL-5的水平較哮喘組明顯降低

4、(P＜0.01)； (3)哮喘組血漿中總IgE水平和OVA特異性IgE水平均明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，腹腔注射IFNγ組和霧化吸入IFNγ組哮喘鼠血漿中總IgE和OVA特異性IgE水平則顯著低于哮喘組(P＜0.01)； (4)HE染色示與正常對(duì)照組相比發(fā)現(xiàn)哮喘組支氣管平滑肌肥厚，粘膜充血、水腫，粘膜層增厚，并有EOS為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，管腔內(nèi)可見(jiàn)粘液栓，支氣管壁周圍有EOS為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，而腹腔注射IFNγ

5、組和霧化吸入IFNγ組小鼠的上述炎癥性改變則明顯減輕； (5)免疫組化檢測(cè)示正常對(duì)照組小鼠肺組織中GATA-3的表達(dá)極少，哮喘模型組小鼠肺組織中GATA-3的表達(dá)明顯增加，而在激發(fā)前就開(kāi)始腹腔注射或霧化吸入IFNγ進(jìn)行干預(yù)治療的C組和D組，小鼠肺組織中GATA-3的表達(dá)明顯減少。 結(jié)論 研究表明,腹腔注射或霧化吸入IFNγ可以抑制細(xì)胞因子IL-4、IL-5的合成、抑制小鼠支氣管哮喘氣道炎癥、抑制EOS在氣道內(nèi)的炎