熒光定量PCR檢測(cè)直腸癌患者外周血及淋巴結(jié)中CK20的表達(dá)及其意義.pdf

1、 目的：本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用熒光定量PCR(FQ-PCR)方法觀察CK20基因產(chǎn)物在直腸癌患者外周血中的表達(dá)情況，分析外周血中CK20基因產(chǎn)物的表達(dá)分別與直腸癌Dukes分期、組織學(xué)分型的關(guān)系；用FQ-PCR檢測(cè)CK20與術(shù)后常規(guī)病理兩種方法檢測(cè)腫瘤周圍腫大淋巴結(jié)，比較各自測(cè)得的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率在Dukes各分期中有無(wú)差異，探討用FQ-PCR檢測(cè)CK20來(lái)預(yù)測(cè)直腸癌微轉(zhuǎn)移以及判斷患者預(yù)后的價(jià)值?！　》椒ǎ?.術(shù)中采集直腸癌患者腫瘤周圍腫大淋巴

2、結(jié)，剖開，一半做常規(guī)術(shù)后病理，另一半于-80℃保存?zhèn)溆谩?.由中山大學(xué)基因研究中心進(jìn)行引物合成CK20mRNA引物及熒光探針堿基序列。3.將提取的RNA樣本進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)；制備陽(yáng)性模板的標(biāo)準(zhǔn)梯度；樣本總RNA作逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)后，取5ul逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為模板，制備樣品檢測(cè)體系；將制備好的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品和檢測(cè)樣本同時(shí)上機(jī)?！　〗Y(jié)論：1.CK20的特異性強(qiáng)，在正常人及腸道良性病患者外周血中無(wú)表達(dá)。2.直腸癌外周血中CK20的表達(dá)量與腫瘤分期有關(guān)，并且