低位直腸癌患者中腹腔灌洗液及區(qū)域淋巴結(jié)中CK20的臨床研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文低位直腸癌患者中腹腔灌洗液及區(qū)域淋巴結(jié)中CK20的臨床研究姓名：王寧申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：于躍明20040301中文摘要方法：隨機選取2002年6月至2002年11月在河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院行外科根治性手術治療的35例低位直腸癌(腹膜返折以下)患者的區(qū)域淋巴結(jié)和腹腔灌洗液標本。區(qū)域淋巴結(jié)標本均于離體半小時內(nèi)采集，液氮速凍，后放置于80“C冰箱儲存?zhèn)溆?；所有標本均?jīng)術后病理證實。腹腔灌洗液于手術開始

2、后馬上留取200ml，其中l(wèi)OOml做腹腔灌洗液細胞學(peritoneallavagecytologyPLC)檢查，另外100ml經(jīng)離心后馬上用Trizol法提取總RNA，經(jīng)凝膠電泳檢測無降解后進行反轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄出的cDNA以13actin作為內(nèi)參照標準，通過針對CK20的特異性引物進行擴增，對擴增產(chǎn)物通過凝膠成像系統(tǒng)進行掃描分析，從而判斷是否存在腫瘤細胞。根據(jù)基因CK20的陽性率的檢出情況，運用x2檢驗對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果：13

3、5例低位直腸癌患者的腹腔灌洗液中，以常規(guī)細胞學方法檢測，有6例陽性，占171％，其中A期0例，B期1例(167％)，C期4例(667％)，D期1例(167％)，陽性率逐漸增加。以RTPCR方法檢測，腹腔灌洗液中CK20mRNA陽性25例，占71螄，，其中A期1例(4％)，B期3例(12％)，C期16例(64％)，D期5例(20％)，DukesA，B，C期陽性率逐漸增加。RTPCR法檢測陽性率明顯優(yōu)于細胞學檢測，x2=20902，p005