福建省四種雙聯(lián)病毒的分子鑒定.pdf

1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文福建省四種雙聯(lián)病毒的分子鑒定姓名：賈素平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：吳祖建20070401福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文福建省四種雙聯(lián)病毒的分子鑒定摘要雙聯(lián)病毒是一種里孿生顆粒形態(tài)的植物單鏈環(huán)形DNA病毒，至今已在多個國家和地區(qū)的多種作物上造成毀滅性危害。自20世紀(jì)90年代起，我國華南等地區(qū)作物雙聯(lián)病毒病害逐年加重。本文對福建省幾種作物和雜草上的雙聯(lián)病毒進行了分子鑒定。在福建省，從勝紅薊、醴腸、三角梅、艾

2、草，葉下珠和辣椒等植物采集了13個呈典型雙聯(lián)病毒病癥狀的樣品，提取其總DNA，用雙聯(lián)病毒的簡并引物擴增了病毒基因組部分序列，序列測定表明，13個雙聯(lián)病毒樣品可歸為四大類：馬來西亞辣椒黃脈病毒(PepperyellowveinMalivirusPYVMW)，賽葵黃花葉病毒(Malvastrumyellowmosaicvirus，MaYMV)，中國番木瓜曲葉病毒(PapayateafcurlChinavirus，PLcCNV)，空心蓮子草黃

3、脈病毒(Alternantherayellowveinvirus，AlWV)。其中FYl、FY2、FY3、FY4、FY5、FY6和F26等7個分離物屬于PYVMW；F09和1721等2個分離物屬于MaYMv；分離物F25屬于PLCcNV；F22、F23和F24等3個分離物屬于砧YvV。F09分離自福建農(nóng)林大學(xué)勝紅薊(Ageratumconyzoides)，全序列測定表明，F(xiàn)09DNAA全長2753個核苷酸，共編碼6個開放閱讀框(0RFs

4、)。通過基因組比較發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)09DNAA與勝紅薊黃脈病毒(Ageratumyellowveinvirus，AYvV)各分離物的基因組全長序列同源性最高(891％棚84％)，而與其它雙聯(lián)病毒的同源性均在796％以下，表明F09是艄Ⅳv的一個分離物。利用DNAB的特異性引物在F09中擴增到全長為1350個核苷酸的DNAl3分子(F09B)，F(xiàn)0913的全序列與番茄曲葉病毒TLCV伴隨的DNAl3的同源性最高，高達956％，而與已報道的其它種類

5、的DNA8的同源性均低于802％。這是首次在福建省發(fā)現(xiàn)勝紅薊黃脈病毒的分離物，首次在勝紅薊上發(fā)現(xiàn)番茄曲葉病毒伴隨的DNAB分子。測定了分離自醴腸F21、F22、F25、F26的全基因組DNAA。序列比較表明，F(xiàn)21和F22之間的同源性高達920％，它們與朋YvV分離物的同源性最高，分別為：92O％和97O％，而與其它種類雙聯(lián)病毒的同源性均低于644％；F25與PLCCNV[G4】的同源性最高，為991％，而與其它種類雙聯(lián)病毒的同源性均低