桑椹病原真菌的鑒定和采后微生物保鮮的研究.pdf

1、桑椹屬于漿果類，生物活性物質(zhì)含量豐富，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，被譽(yù)為“21世紀(jì)最佳的保健果品”之一。采前桑椹菌核病和采后果實(shí)腐生性病害是導(dǎo)致桑椹產(chǎn)量損失的重要原因。本文主要對(duì)桑椹采前和采后病原真菌的分離鑒定，生防微生物對(duì)采后致腐菌的拮抗抑制作用和生防微生物采后處理對(duì)桑椹品質(zhì)的影響等三個(gè)方面進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下：
　　（1）從發(fā)病菌核培養(yǎng)出的子實(shí)體鑒定出桑椹菌核病致病菌的種類。將從桑園采集的桑椹菌核病菌核在土壤中培養(yǎng)產(chǎn)生三種不同形狀的子

2、實(shí)體，將不同形狀的子實(shí)體分離體通過真菌ITS1/ITS4引物擴(kuò)增測(cè)序，結(jié)果經(jīng)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)BLAST比對(duì)同源性分析，三種子實(shí)體與桑實(shí)杯盤菌（Ciboria shiraiana），核地杖菌（Scleromitrula shiraiana）和肉阜狀杯盤菌（Ciboria carunculoides strain）相似度分別為99％、97%和98%。
　?。?）分離獲得三株桑椹致腐性真菌。從采后腐爛桑椹上分離真菌，經(jīng)科赫法則反接驗(yàn)證后，

3、通過顯微形態(tài)和真菌 ITS測(cè)序 BLAST同源比對(duì)分析，獲得三株桑椹致腐真菌，分別是葡萄孢屬（Botrytis spp）霉菌，匐枝根霉（Rhizopus stolonifer spp.）菌和毛霉屬（Mucor spp.）霉菌。
　?。?）TR16、TR66和BS對(duì)桑椹致腐菌具有拮抗活性。通過平板對(duì)峙和發(fā)酵濾液抑菌實(shí)驗(yàn)，從定殖能力、重寄生能力及對(duì)三株致腐菌的生長(zhǎng)抑制率等進(jìn)行生防微生物對(duì)致腐菌拮抗活性的分析，并以1%殼聚糖（CTS）與

4、TR16，TR66發(fā)酵濾液的抑菌活性進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果表明TR16和TR66比桑椹致腐菌空間營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)能力強(qiáng)，空間定殖能力≧50%，對(duì)峙培養(yǎng)對(duì)致腐菌菌絲生長(zhǎng)抑制率為60%-80%。BS對(duì)葡萄孢屬霉菌對(duì)峙培養(yǎng)的菌絲生長(zhǎng)抑制率為58.08%。1%CTS與空白對(duì)照相對(duì)三株致腐菌的RF1,RF2，RF3的平均菌絲生長(zhǎng)抑制率分別為30.12%，24.53%和18.75%，TR66發(fā)酵濾液對(duì)三株致腐菌的抑制效果最強(qiáng)，顯著高于1%殼聚糖（CTS）處理。TR

5、16發(fā)酵濾液對(duì)菌株RF2的抑制效果顯著性優(yōu)于CTS處理，對(duì)RF1和RF3的抑制作用與1%CTS無顯著差異。
　?。?）TR16，TR66和BS的發(fā)酵濾液和孢子懸液采后處理對(duì)桑椹品質(zhì)的影響。以常用的果蔬保鮮劑1%CTS作對(duì)照，蒸餾水處理作為空白處理，結(jié)果表明殼聚糖處理桑椹后顯著性抑制采后水果腐爛率、失重率、可溶性固形物和抗壞血酸含量的損失，花青素，黃酮，總酚抗氧化物質(zhì)的含量和抗氧化活性比對(duì)照組顯著性的提高。不同形式的TR66和BS處

6、理顯著性的抑制了采后果實(shí)的腐爛率，失重率，可溶性固形物質(zhì)含量和抗壞血酸的降低。在儲(chǔ)藏的過程中，生物活性物質(zhì)花青素、黃酮和總酚的含量變化，呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。CTS，TR16，TR66和BS處理后花青素的含量比空白對(duì)照組顯著性提高，三株生防微生物發(fā)酵液采后處理使桑椹中黃酮和總酚物質(zhì)含量比對(duì)照組顯著性的提高。在儲(chǔ)藏21d時(shí)，TR66發(fā)酵濾液處理桑椹果實(shí)品質(zhì)最好。
　　本研究對(duì)首先對(duì)影響桑椹品質(zhì)的兩種病害的致病性真菌進(jìn)行培養(yǎng)鑒定；其