HBX在卵圓細(xì)胞中上調(diào)AKT信號(hào)對(duì)c-Jun表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究乙肝病毒X 蛋白（HBX）在肝臟卵圓細(xì)胞中通過(guò)AKT 信號(hào)對(duì)c-Jun 蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。
　　 方法：1.通過(guò)熒光顯微鏡、細(xì)胞免疫熒光、Western Blot鑒定HBX 蛋白在pEGFP-HBX-LE6細(xì)胞中的表達(dá)。
　　 2.將pEGFP-HBX-LE6 卵圓細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組，L02-HBX細(xì)胞作為陽(yáng)性對(duì)照組，LE6 卵圓細(xì)胞、轉(zhuǎn)染空載體的pEGFP-LE6 卵圓細(xì)胞為一般對(duì)照組。通過(guò)Western Bl

2、ot技術(shù)檢測(cè)p-Akt、AKT和c-Jun的蛋白表達(dá)水平。
　　 3.用PI3K/AKT 信號(hào)通路特異性抑制劑LY294002 阻斷PI-3K/AKT 信號(hào)通路，通過(guò)Western Blot 技術(shù)檢測(cè)在AKT 通路被抑制后c-Jun 蛋白水平的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HBX基因的pEGFP-HBX-LE6 及轉(zhuǎn)染空載體的pEGFP-LE6 卵圓細(xì)胞株在熒光顯微鏡下可見(jiàn)綠色熒光；HBX 蛋白在pEG

3、FP-HBX-LE6細(xì)胞中有表達(dá)；細(xì)胞免疫熒光顯示HBX在pEGFP-HBX-LE6 卵圓細(xì)胞中表達(dá)，且主要位于細(xì)胞核。
　　 2.p-Akt、c-Jun 蛋白在pEGFP-HBX-LE6細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)。
　　 3.AKT 通路被抑制后，HBX 上調(diào)的c-Jun 蛋白在pEGFP-HBX-LE6中隨之下調(diào)。
　　 結(jié)論：HBX在肝臟卵圓細(xì)胞中上調(diào)AKT 信號(hào)及c-Jun的蛋白表達(dá)，并且HBX 蛋白可通過(guò)AKT 信