蛋白激酶B與蛋白激酶C在人骨性關(guān)節(jié)炎軟骨組織中的表達研究.pdf

1、目的：觀察并研究PKB/Akt和PKC在人膝骨性關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis，OA)關(guān)節(jié)軟骨中的表達及其與軟骨細胞凋亡的相關(guān)性，探討PKB/Akt和PKC信號分子在OA發(fā)病中的作用，為從分子水平治療OA提供新靶點。
　　 方法：選取38例因膝骨性關(guān)節(jié)炎行膝關(guān)節(jié)置換的患者為實驗組，以11例因意外受傷行髁上截肢手術(shù)的患者為對照組，兩組均從股骨內(nèi)髁負重區(qū)取軟骨組織。常規(guī)HE染色和番紅-O染色觀察組織學(xué)形態(tài)；免疫熒光法和免疫組化

2、法觀察PKB/Akt和PKC在軟骨細組織的分布：TUNEL法檢測軟骨細胞的凋亡狀況；免疫組化法和WesternBlotting法觀察關(guān)節(jié)軟骨PKB/Akt、p-Akt和PKC的表達。用Image-ProPlus6.0和Gelpro4.5專業(yè)圖像分析軟件進行定量分析。采用隨機兩樣本t檢驗、配對兩樣本t檢驗、Pearson相關(guān)性檢驗進行統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果：①組織形態(tài)學(xué)觀察：正常關(guān)節(jié)軟骨組織厚度正常，淺表層表面光滑、平整，軟骨細胞

3、排列整齊，潮線完整，無細胞外基質(zhì)丟失；OA關(guān)節(jié)軟骨組織厚度變薄，淺表層粗糙、破潰或消失，軟骨細胞排列紊亂，潮線斷裂，細胞外基質(zhì)嚴重丟失。②軟骨細胞凋亡計數(shù)結(jié)果：OA軟骨組織中軟骨細胞的凋亡率高于正常(t=6.551，P＜0.05)；無論OA還是正常軟骨組織過渡層的凋亡率均高于放射層(t=5.671，t=5.237，p＜0.05)。③軟骨組織中PKB/Akt及PKCα的表達：PKB/Akt在正常軟骨組織中的表達高于在OA(t=9.848，

4、P＜0.05)，而磷酸化的PKB/Akt(p-Akt)卻在OA軟骨組織中表達較高；PKCα在正常軟骨組織中的表達低于OA(t=6.401，P＜0.05)。④軟骨組織中PKB/Akt及PKCα的分布：無論在正常還是在OA關(guān)節(jié)軟骨組織中，PKB/Akt和PKCα主要分布在過渡層和放射層，過渡層PKB/Akt和PKCα的表達均高于放射層，其差異具有顯著性，統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)依次為：PKB/Aktt=44.296，P＜0.05，PKCαt=5.343，