反義P44探討P44-XPD亞復(fù)合物對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的生物學(xué)影響.pdf

1、目的：應(yīng)用反義P44轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞SMMC-7721，觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)野生型p44、xpd、cdk7、cdk2、cdc25A、c-myc等基因的表達(dá)變化以及對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。探討P44基因與xpd、cdk7、cdk2、cdc25A，c-myc的相互作用，以及對(duì)細(xì)胞周期的影響。 方法：應(yīng)用P44反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞SMMC-7721，并用人肝癌細(xì)胞SMMC-1721作為空白對(duì)照。用RT—PCR法檢測(cè)細(xì)胞克隆中P44 mRNA

2、表達(dá)，用RT-PCR、Western blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染P44反義寡核苷酸后細(xì)胞內(nèi)人剪切修復(fù)基因xpd以及癌基因cdk7、cdk2，cdc25A、c-myc的表達(dá)量變化，并用MTT和流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖及其細(xì)胞周期的變化。 結(jié)果：P44基因反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞SMMC-7721后，具有抑癌作用的人剪切修復(fù)基因xpd mRNA的表達(dá)量顯著減少，肝癌內(nèi)的分子網(wǎng)絡(luò)出現(xiàn)相應(yīng)的變化，細(xì)胞周期調(diào)控基因cdk7、cdk2、cdc25A